多囊卵巢综合征患者颗粒细胞FSHR、LHR、mRNA的表达

摘要

目的：多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome，PCOS)是一种常见的生殖功能异常，也是无排卵性不孕的主要病因之一，其主要内分泌特征为高雄激素血症、高胰岛素血症、黄体生成素(LH)水平升高、LH与卵泡刺激素(FSH)比值升高。临床上常表现闭经或月经稀发，无排卵和不孕。患者须通过药物诱导排卵方能解决生育问题。在药物促排卵过程中，卵巢的反应性存在明显的个体差异，与卵巢功能正常者相比，同样剂量的促排卵药物，PCOS患者更有可能出现OHSS，其原因尚不明了。本研究通过观察在我院接受体外受精与胚胎移植(invitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)的PCOS患者与卵巢功能正常者在应用促排卵药物后，卵巢颗粒细胞中促卵泡激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)mRNA的表达，并结合基础血清、垂体降调节后月经第2天、HCG日血清中性激素水平及及卵泡液中促卵泡激素(FsH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)水平变化，进一步探讨PCOS患者颗粒细胞中促性腺激素受体与对促排卵药物反应的关系。 方法： 1.研究对象： 1.1 PCOS组(实验组)：选择2007年5月-2007年10月在河北医科大学第二医院生殖中心接受IVF-ET治疗的多囊卵巢综合征患者24例，平均年龄在28.83±3.16岁。 1.2 对照组：随机选择同期在本生殖中心接受IVF-ET治疗的不孕患者20例，月经规律，不孕原因为输卵管因素，且基础血(月经第三天)FSH、LH、E2、T、催乳素(PRL)在正常范围内，平均年龄在30.17±3.21岁。 所有患者均为初次进入周期，空腹血糖均正常，无全身性及其他内分泌性疾病，男方精液正常。 2.研究方法和测定内容： 2.1 标本采集：PCOS组和对照组均采用口服避孕药(达英-35)控制性超促排卵长方案治疗，根据阴道B超和血清中LH、E2水平检测卵泡发育。当B超显示下有一个卵泡平均直径≥18mm,两个卵泡平均直径≥17mm，或者三个卵泡平均直径≥16mm时，于当日21:00给予肌肉注射绒促性素(HCG)5000-10000 iu，36小时后在阴道超声引导下行采卵术。取未被血染的穿刺液经2000 r/min离心10 min，上清液置-20℃冰箱保存。收集所有的卵泡穿刺液，Ficoll分离获得颗粒细胞，加入Trizol(Invitrogen)，置1.5ml EP管中，经液氮快速冷冻后于-70℃冰箱保存。 2.2 标本测定：RT-PCR测定颗粒细胞FSHR及LHR mRNA相对表达量。 2.3 内分泌激素测定：化学发光法测定基础血清FSH，LH，T，E2，空腹胰岛素水平(INS)，垂体降调节后月经第2天血清FSH、LH，HCG日血清LH，E2以及卵泡液FSH，LH，T，E2。 结果： 1.PCOS组和对照组间颗粒细胞FSHR、LHRmRNA相对表达量的比较 1.1 PCOS组颗粒细胞FSHRmRNA相对表达量(0.675±0.106)较对照组颗粒细胞 FSHRmRNA(0.567±0.132)增高，两组之间比较有统计学意义(P<0.05)。 1.2 PCOS组颗粒细胞LHRmRNA相对表达量(0.647±0.123)较对照组颗粒细胞LHRmRNA(0.519±0.156)增高，两组之间比较有统计学意义(P<0.05)。 2.各指标之间的直线相关关系通过多元线性回归分析，显示获卵数与FSHRmRNA相对表达量呈正相关，与LHRmRNA相对表达量无明显直线相关关系。回归方程分别为PCOS组：Y=-22.18+50.51X，R2=0.66， F=20.36，P=0.0001；对照组：Y=-0.11+26.32X，R2=0.773，F=61.36，P=0.00013 PCOS组和对照组血清性激素浓度的比较基础血清中，LH、T、空腹胰岛素水平在PCOS组高于对照组，FSH，E2两组无统计学差异；垂体降调节后月经第2天血清FSH、LH在进行rhFSH治疗前无统计学差异。与对照组相比，PCOS组HCG日血清LH增高，E2两组相近。 4.PCOS组和对照组卵泡液中性激素浓度的比较PCOS组患者卵泡液中FSH浓度(4.80±1.44 mIU/ml)，与对照组(6.47±0.95 mIU/ml)相比，明显降低(P=0.003)，而LH浓度、T水平明显升高(P值分别为0.004，0.005)，有统计学意义。同时，两组患者卵泡液中E2浓度相近。 5.PCOS组和对照组IVF周期特征比较两组患者rhFSH治疗总用量和时间无明显差异，hCG日最大血浆E2水平相近。然而PCOS组获卵数(21±8)高于对照组(15±4)，且平均卵泡直径PCOS组(18.02±1.80 mm)小于对照组(19.41±2.32mm)，P<0.05，有统计学意义。 结论： 1.与对照组患者相比，PCOS患者基础血清睾酮(T)和胰岛素(INS)增高，超促排卵过程中总卵泡数增加而卵泡直径下降；PCOS卵泡液中FSH、P浓度明显降低，而LH浓度、T水平明显升高，同时，两组患者卵泡液中E2浓度相近，提示PCOS患者存在多种内分泌异常和卵泡发育异常。 2.超排卵过程中，颗粒细胞FSHR mRNA表达在PCOS组高于对照组，获卵数与颗粒细胞FSHRmRNA表达均成正相关，提示FSHRmRNA表达量与卵巢对外源性促性腺激素反应有关，FSHRmRNA的表达增高可能引起卵巢反应性增高，PCOS组获卵数及FSHRmRNA的表达高于对照组，推测FSHRmRNA的表达增高可能是PCOS患者易发生卵巢过度刺激的原因之一；而卵巢反应性与颗粒细胞LHR表达量无明显相关性。 3.超排卵过程中，颗粒细胞LHRmRNA表达在PCOS组高于对照组，推测PCOS卵泡可能存在提早的黄素化。

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摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 卵巢中促性腺激素受体在女性不孕领域的研究进展

致谢

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