塞来昔布对人结肠癌裸鼠种植瘤COX-2及Survivin表达的影响

摘要

目的：环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)是一种诱导型酶，可以通过促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进血管发生、诱导肿瘤细胞的侵袭力等多种途径参与肿瘤的发生和发展。Survivin是近来发现的凋亡抑制蛋白(inhibitor ofapoptosis protein,IAP)家族成员之一，是迄今为止发现的最强的凋亡抑制因子。Survivin在终末分化的成人组织(胸腺和生殖腺除外)中检测不到，而在大多数肿瘤组织中有不同程度的表达。 近年来结肠癌的发病率不断上升，在全世界范围内威胁着人类的健康和生命，而人类80％以上的结肠癌都过表达COX-2。已有动物实验表明，传统的非甾体类抗炎药(NSAIDs)或选择性COX-2抑制剂可抑制遗传的及化学诱导的结肠肿瘤的生长，所以探索选择性COX-2抑制剂预防和治疗人类结直肠癌的可能作用机制将有重要意义。 本实验通过建立人结肠癌裸鼠皮下种植瘤模型，以选择性COX-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人结肠癌裸鼠皮下种植瘤模型进行干预治疗，研究塞来昔布对人结肠癌裸鼠种植瘤COX-2及Survivin表达的影响。 方法：选取4～5周龄、体重20～24g BALB/c雌性裸鼠12只，取处于对数生长期的人结肠癌HT-29细胞制成单细胞悬液(细胞密度为1×107/ml)接种与裸鼠颈背部皮下，每只0.2ml。接种完毕后，所有裸鼠于SPF条件的层流架中继续饲养。定期观察裸鼠生长情况及成瘤情况，并用游标卡尺测量肿瘤的长径(a)、短径(b)，按公式“V=ab2/2”估算肿瘤体积。待肿瘤中位体积约100mm3(16天)后，将所有裸鼠随机分为对照组和塞来昔布组，每组6只。塞来昔布采用灌胃方式给药，剂量为40mg/kg，对照组喂以同体积的蒸馏水。连续用药30天，最后一次给药24小时后，测量肿瘤体积，以颈椎脱位方式处死裸鼠，连同包膜完整剥出肿瘤组织，部分肿瘤组织置于4％多聚甲醛溶液中固定后，用免疫组织化学染色检测COX-2表达，COX-2阳性产物为棕黄色颗粒，位于细胞质中，细胞浆及细胞核周围呈棕黄色者判为阳性。先在低倍镜下对组织切片全面观察，随后于200倍光镜下，随机观察10个视野，以病理图像分析系统计算平均积分光密度值；部分肿瘤组织迅速装于冻存管中，置于液氮中保存用于Westernblot检测Survivin表达。 数据以mean±s表示，应用SPSS 12.0统计学软件进行成组t检验统计分析，P＜0.05差异有统计学意义。 结果：1对COX-2免疫组织化学染色切片进行积分光密度测定，对照组和塞来昔布组的积分光密度值分别为15091.38±896.46和7862.12±847.72，t检验结果显示，与对照组比较，塞来昔布组COX-2表达水平明显降低(P＜0.001)。 2对照组和塞来昔布组均可见Survivin蛋白表达，与对照组相比，塞来昔布组Surivin的表达明显减弱。 结论：1 塞来昔布可以抑制裸鼠人结肠癌种植瘤COX-2和Survivin的表达。 2.COX-2可能通过促进Survivin的表达参与了结直肠癌的发生与发展。

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结论

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综述 COX-2、Survivin与肿瘤的发生发展

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