铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及部分耐药机制研究

摘要

目的：铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)是临床上常见的条件致病菌，其临床感染率已跃居病原菌的首位。随着抗生素的广泛应用，铜绿假单胞菌对亚胺培南等碳青霉烯类抗生素耐药已成为临床治疗中的难题。 本论文对临床分离的铜绿假单胞菌分别进行亚胺培南等12种抗生素的耐药性试验并对不同科室耐药情况进行比较，旨为临床合理使用抗生素提供科学依据。另外，为了了解铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制，本论文从金属β内酰胺酶的产生和外膜蛋白OprD2缺失及低表达等方面分别进行了研究。 方法：对河北医科大学第四医院2006年1月-2007年1月从临床分离的368株非重复的铜绿假单胞菌用美国德灵公司的全自动微生物鉴定和药敏分析仪对亚胺培南(IMP)等12种常用抗生素的最低抑菌浓度(MIC)进行检测；选出对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌94株做为受试株，采用EDTA双纸片协同法和Etest法对其进行金属β内酰胺酶的抑制实验，测定金属β内酰胺酶的产生，同时用PCR方法检测金属β内酰胺酶的基因表达；用PCR方法和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法检测外膜蛋白OprD2缺失。 结果： 1.368株铜绿假单胞菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶等的耐药率分别为41.58％、41.03％、46.20％。不同科室抗生素耐药情况不同，亚胺培南耐药率ICU科最高为62.50％，其次为呼吸12.77％。 2.94株受试菌用EDTA.Na2纸片分别和亚胺培南、美罗培南、头孢他啶纸片联合法，检测出15株产金属β内酰胺酶；Etest方法有3株金属β内酰胺酶阳性菌，PCR扩增法未检测出IMP-1、VIM-1、VIM-2、SPM-1型金属β内酰胺酶阳性菌株。 3用PCR扩增法和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)在94株受试菌中检出外膜蛋白完全缺失的铜绿假单胞菌4株。 结论： 1.河北医科大学第四医院铜绿假单胞菌对亚胺培南的总耐药率为41.58％。各个科室相比较以ICU科耐药最严重，其次为呼吸、内分泌等科室。 2.河北医科大学第四医院铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的机制与外膜蛋白OprD2缺失和低表达有关，与金属β内酰胺酶直接产生无关。

目录

声明

摘要

前言

研究路线

第一部分：铜绿假单胞菌的耐药性

材料与方法

结果

附表

附图

讨论

结论

参考文献

第二部分金属β-内酰胺酶的检测

材料与方法

结果

附图

论讨

结论

参考文献

第三部分 外膜孔道蛋白（OprD2）缺失的检测及其与耐药性的关系

材料与方法

结果

附表

附图

讨论

结论

参考文献

结论

综述 B类获得性金属酶的研究进展

致谢

个人简历