青海同德藏族人群感染乙肝病毒基因型及变异的初步研究

摘要

目的：了解青海省同德县藏族自然人群感染乙肝病毒（HBV）基因型、血清亚型分布特征，并初步分析基因型与临床类型之间的关系；了解青海省同德县藏族自然人群感染HBV核心基因启动子（BCP）T1762/A1764双突变、前核（PreC）A1896突变的分布状况并初步分析其与基因型、HBeAg状态、临床类型之间的关系。
　　 方法：选取2006年经青海同德藏族人群乙肝患病率调查发现的表面抗原（HbsAg）阳性的311份血清，通过提取核酸和巢式PCR扩增，获得HBV S和C基因片段并直接测序。使用DNASTAR软件，将样本HBV S基因和C基因测序结果与GeneBank中的HBV参考株比对并进行系统发生树分析，确定其基因型；依据样本S基因序列推导出其氨基酸序列，根据HBV包膜蛋白S上的共同抗原决定簇α与第122、127，160位氨基酸确定其血清亚型；以参考序列AB033556为标准，将样本C基因测序结果与之相比，确定是否发生BCPT1762/A1764双突变、PreC A1896突变。最后，使用SAS8.0软件对结果进行统计分析，率的比较采用x错误!未指定书签。2检验及Fisher确切概率法。
　　 结果：
　　 1、311例来源于自然人群的HBsAg阳性血清中，S基因扩增阳性304例，扩增阳性率为97.8％；扩增产物测序成功298例，测序成功率为98.0％。C基因扩增阳性296例，扩增阳性率为95.2％； C基因扩增产物测序成功283例，测序成功率95.6％。S、C基因均扩增阳性并测序成功的271例，占311例HBsAg阳性血清的87.1％。
　　 2、271例基因型可确定样本中，C/D重组型261例，占96.3％，C型基因10例，占3.7％；血清ayw2亚型259例，占95.6％，adr亚型10例，占3.7％，adw2亚型2例，占0.7％。C/D重组基因型中，男性128例，女性133例；C基因型中，男性4例，女性6例，不同基因型的性别构成没有差异（P=0.5745）。<15岁组、15～组、30～组、50～组中C/D重组基因型分别有54、95、90、22例，C基因型分别有4、4、1、1例，不同基因型年龄别构成亦无显著差异（错误！未指定书签。P=0.3261）。
　　 3、271例基因型可确定样本中，免疫耐受期慢性乙肝126例，其中C/D重组基因型119例，C基因型7例； HBeAg阳性的慢性乙肝32例，其中C/D重组基因型32例，C基因型0例；非活动性慢性乙肝90例，其中C/D重组基因型88例，C基因型2例；HBeAg阴性的慢性乙肝23例，其中C/D重组基因型22例，C基因型1例；不同基因型的临床类型构成没有差异（P=0.3862）。
　　 4、271例基因型可确定样本中，发生BCP T1762/A1764双突变的有56例，突变率为20.7％；其中，男性、女性分别为25、31，差异无统计学意义（P=0.4944）；各年龄组人数分别为8、14、23、11，突变率随年龄增加而增高（P<0.005）；C基因型与C/D重组型中分别为0、56，C/D重组型突变率高于C基因型（P=0.0294）；HBeAg阳性者与HBeAg阴性者中分别为20、36，HBeAg阴性者突变率高于HBeAg阳性者（P<0.0001）；免疫耐受期慢性乙肝、非活动性慢性乙肝、HBeAg阳性慢性乙肝、HBeAg阴性慢性乙肝者中分别为12、29、8、7，差别有统计学意义（P=0.0003），HBeAg阳性的慢性乙肝者BCP T1762/A1764双突变发生率高于免疫耐受期的慢性乙肝者（P<0.0001）。
　　 5、271例基因型可确定样本中，发生PreC A1896突变的有27例，占10.0％；男性、女性中分别为10、17，差异无统计学意义（P=0.201）；各年龄组分别为5、10、8、4，差异没有统计意义（P>0.25）；C基因型与C/D重组型中分别为0、27，差异无统计学意义（P=0.6053）；HBeAg阳性者与HBeAg阴性者中分别为5、22，HBeAg阴性者突变率高于HBeAg阳性者（P<0.0001）；免疫耐受期慢性乙肝、非活动性慢性乙肝、HBeAg阳性慢性乙肝、HBeAg阴性慢性乙肝中分别为4、21、0、2，差异有统计学意义（P<0.0001），其中非活动性慢性乙肝突变发生率高于免疫耐受期慢性乙肝（P<0.0001）。
　　 结论：青海省同德县藏族人群感染HBV基因型以C/D重组型为主，血清型以ayw2为主；青海同德藏族人群感染HBV BCP T1762/A1764双突变与PreC A1896突变流行程度相对较低；这两种突变与HBeAg阴性有关，BCP T1762/A1764双突变可作为预测该地区慢性乙肝病人结局的分子生物学标志。

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结论

参考文献

综述 乙肝病毒感染自然史的研究进展

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