IFN-γ基因多态性与青海地区藏族人群乙肝病毒易感性的相关性研究

摘要

目的：通过青海地区藏族人群中IFN-γ基因多态性的2个位点与慢性乙肝易感性之间的关系，筛选出主要相关位点，为预测青海地区藏族人群的HBV易感性的风险奠定基础。进而为乙肝的临床诊断及预防提供新的理论和依据。
　　方法：（1）研究对象：拟选自2012年6月-2013年9月期间在青海省传染病医院和青海大学附属医院经临床及实验室检查确诊的青海地区慢性乙肝藏族患者250例（病例组）及健康志愿者134例(对照组)为研究对象。（2）基因多态性分析：采用试剂盒提取外周血基因组DNA，采用飞行质谱技术分析检测基因γ-干扰素的+874A/A、+874A/T、+874T/T、+2109C/C、+2109C/T、+2109T/T的基因型。（3）数据分析：计算出各位点基因型及等位基因频率，分析组间各基因型的差异性，如若P＜0.05，还需应用logistic多元回归，进一步分析各基因型与慢性乙肝易感性之间的关系,若P＞0.05，则基因位点的多态性与乙肝易感性则无关。
　　结果：（1）+2109位点在病例组以及对照组之间的频率分布：①+2109C/C在病例组和对照组分别为10.5％和14.3%，经统计学分析结果表明,各组间的分布频率未见显著性差异；②+2109C/T在病例组和对照组分别为47.3%和43.7%，经统计学分析结果表明,各组间的分布频率未见显著性差异；③+2109T/T在病例组和对照组分别为42.2%和42.1%，经统计学分析结果表明,各组间的分布频率未见显著性差异；（2）+874位点在病例组以及对照组之间的频率分布:①+874A/A在病例组和对照组分别为3.1%和2.4%，经统计学分析结果表明,各组间的分布频率未见显著性差异；②+874A/T在病例组和对照组分别为30.6%和19.8%，经统计学分析结果表明,各组间的分布频率未见显著性差异；③+874T/T在病例组和对照组分别为66.3%和77.8%，经统计学分析结果表明,各组间的分布频率未见显著性差异；（3）+874等位基因T在病例组和对照组基因频率分别为81.6%和87.7%，经统计学分析携带等位基因T的频率升高表明乙肝的易感性越低。
　　结论：(1)IFN-γ+874基因位点多态性与青海地区藏族人群HBV感染的易感性可能无关；(2)IFN-γ+2109基因位点多态性与青海地区藏族人群HBV感染的易感性可能无关；(3)IFN-γ+874的等位基因T可能是青海藏族乙肝的保护性基因。

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第1章 前言

第2章 材料与方法

2.1研究对象

2.2一般情况

2.2.1方法：

2.2.2主要仪器

2.2.3主要试剂

2.2.4相关分析软件

2.3实验流程

2.3.1基因组DNA的提取

2.3.2 DNA质量检测

2.3.3 DNA浓度及纯度监测

2.3.4基因组DNA的浓缩与纯化

2.3.5飞行时间质谱方法进行基因分型

2.4 统计学分析

第3章 结果

3.1 IFN-γ+2109C/T位点

3.3.1IFN-γ+2109C/T位点各基因型及等位基因频率

3.3.2 IFN-γ+2109C/T各组间基因型和等位基因分布频率的比较

3.2 IFN-γ+874A/T位点

3.2.1 IFN-γ+874A/T位点各基因型及等位基因频率

3.2.2 各组间IFN-r+874A/T基因型和等位基因分布频率的比较

3.3基因型频率 Hardy-Weinberg 平衡检验

第4章 讨论

第5章 结论

参考文献

附录

附录A DNA提取试剂盒成分以及提取步骤

附录B DNA纯化浓缩试剂盒：

附录C 5×TBE电泳缓冲液（pH=8.0）

附录D NanoDrop2000操作流程

致谢

综述: 慢性乙肝病毒与IFN-γ基因多态性的对比研究

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