喘息急性发作期儿童肠道微生态学变化与血浆Th1/Th2关系的临床研究

摘要

目的:喘息是儿童生后第一年的普遍症状。儿童喘息和哮喘是两个不同的概念,但具有相似的临床表现和转归,两者之间存在有序贯的共同的发生机制。因此减少婴幼儿期喘息的发生率,就预示着降低儿童支气管哮喘的发病率。本研究旨在应用ELISA方法测定血浆中的INF-γ、IL-4水平,探讨Th1/Th2在儿童喘息发病机制中的作用及意义,从免疫学角度探讨儿童喘息的发病机制;并检测喘息急性发作期儿童粪便中双歧杆菌和大肠杆菌的数量,从另一个角度即微生态学的角度,探讨喘息急性发作的发生机制,及两者间的相互关系,力图阐明肠道正常菌群、辅助性T细胞在喘息急性发作期所发挥的作用,为日后益生菌在生命早期干预,通过纠正Th1/Th2平衡预防和治疗儿童喘息提供理论依据。
　　 方法:收集2009年9月-2010年2月在河北医科大学第三医院儿科就诊及住院的伴有喘息的下呼吸道感染患儿(即A组)47例,诊断符合下呼吸道感染的标准,伴有喘息症状,发作时双肺可闻及呼气相哮鸣音,呼气相延长,并且除外其他引起喘息的疾病。A1组22例,入院前2周内未应用抗生素,其中男8例,女14例,年龄为2.1±0.26岁;A2组25例,入院前应用抗生素治疗5天以内,其中男14例,女11例,年龄为1.9±0.19岁。同期收集不伴有喘息的下呼吸道感染患儿(即B组)40例,诊断符合下呼吸道感染的标准,B1组18例,入院前2周内未应用抗生素,其中男8例,女10例,年龄为2.2±0.24岁;B2组22例,入院前应用抗生素治疗5天以内,其中男9例,女13例,年龄为1.8±0.21岁。同时选择同期来我院健康查体的儿童(即C组)30例,其中男14例、女16例,年龄为2.2±0.25岁。三组之间性别、年龄、体重、喂养方式、生活地域均无显著性差异。A、B组于入院当日,C组于清晨空腹状态下抽取静脉血2ml,离心1500rpm15min后取上清,应用ELISA方法测定血浆IL-4、INF-γ、TGF-β1的水平,并计算INF-γ/IL-4;同步收集粪便,应用细菌16S rRNA荧光定量PCR方法测定双歧杆菌、大肠杆菌的数量,并计算B/E比值。
　　 结果:
　　 1各组儿童粪便肠道菌群的变化
　　 A1、B1组粪便双歧杆菌数量、B/E值均低于C组,差异有统计学意义(p＜0.05);A1与A2、A1与B1组双歧杆菌数量、B/E值比较无差异(p＞0.05);B1与B2组比较,双歧杆菌数量、B/E值降低,差异有统计学意义(p＜0.05)(见Table2)。
　　 2各组血浆INF-γ、IL-4(pg/ml)水平及INF-γ/IL-4比值变化
　　 2.1血浆INF-γ:Al组血浆INF-γ低于C组,差异有统计学意义(p＜0.05);B1组血浆INF-γ高于C组,差异有统计学意义(p＜0.05);A1与B1组比较,血浆INF-γ降低,差异有统计学意义(p＜0.05);A1与A2、B1与B2组比较,血浆INF-γ无差异(p＞0.05)。
　　 2.2血浆IL-4:A1组血浆IL-4高于C组,差异具有统计学意义(p＜0.05)。B1组血浆IL-4高于C组,差异有统计学意义(p＜0.05);A1与B1组比较,血浆IL-4升高,差异有统计学意义(p＜0.05);A1与A2、Bl与B2组比较,血浆IL-4无差异(p＞0.05)。
　　 2.3血浆INF-γ/IL-4:A1组血浆INF-γ/IL-4低于C组,差异有统计学意义(p＜0.05);B1组血浆INF-γ/IL-4高于C组,差异有统计学意义(p＜0.05);A1与B1组比较,血浆INF-γ/IL-4降低,差异有统计学意义(p＜0.05);A1与A2、B1与B2组比较,血浆INF-γ/IL-4无差异(p＞0.05)。
　　 3喘息急性发作期儿童INF-γ、IL-4与TGF-β1相关分析
　　 A1、A2组血浆IL-4与TGF-β1呈直线负相关关系(r1=-0.51,r2=-0.69;P＜0.05);血浆TGF-β1与INF-γ无直线相关关系。
　　 4喘息急性发作期儿童INF-γ/IL-4与B/E比值的相关分析
　　 A1组儿童INF-γ/IL-4与B/E值存在直线正相关关系(r=0.43,P＜0.05)。
　　 5白细胞(WBC)和C-反应蛋白(CRP)在A1、B1组中的变化
　　 A1组WBC数目和CRP水平均低于B1组,差异有统计学意义(p＜0.05)。
　　 结论:
　　 1喘息急性发作期儿童血浆INF-γ水平降低,IL-4水平升高,Th1/Th2失衡,表明喘息儿童体内存在辅助性T细胞的比例失衡,并参与了发病机制。
　　 2喘息急性发作期儿童肠道菌群紊乱,表现为双歧杆菌数量和B/E值降低,说明喘息急性发作可以影响肠道微生态学的生境。
　　 3通过肠道B/E比值与TH1/TH2比值的相关分析表明,肠道菌群的是否平衡关系到免疫是否平衡,在喘息急性发作时两者相互影响,表现在B/E比值的下降和Th1/Th2的失衡。所以,两者间存在相互影响,互为因果的关系。
　　 4本研究结论为临床早期益生菌干预防治儿童喘息提供重要的的理论依据。

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材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 肠道LE常菌群结构在预防和治疗儿童过敏性疾病作用机制探讨

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