EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ在乳腺癌前病变及乳腺癌中的表达研究

摘要

目的：乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，乳腺癌总发病数占女性全部恶性肿瘤发病数的22.8％，死亡数占总癌死亡数的14.1％。近年来，我国城乡妇女乳腺癌发病率、绝对患病人数及死亡率也呈明显上升趋势。随着科学技术的不断进步，从分子、基因等角度探讨乳腺癌的发生发展规律已经成为肿瘤界热点研究领域。
　　 乳腺非特殊型浸润性乳腺癌(invasive ductal carcinoma，no otherwise specified，IDC NOS)是浸润性乳腺癌中最常见的类型，来源于乳腺终末导管小叶单位。乳腺导管原位癌（ductal carcinoma in situ,DCIS）是肿瘤性的导管内病变，是浸润性乳腺癌重要的前驱病变。乳腺导管内乳头状瘤（intraductal papilloma，IDP）多发生于40～50岁的经产妇，系乳晕区大导管内的一种良性肿瘤，病因尚未确定。近来分子生物学研究结果显示IDP为单克隆病变，提示其为肿瘤性增生。
　　 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)产生的信号效果可以导致细胞分裂，EGFR过度表达有可能引起细胞生长失控。Ras基因的促增殖作用已经被诸多研究所证实，其参与的Ras/MAPK通路中有几个成员与癌基因有关，该通路的不恰当激活可导致肿瘤的发生。中心体(centrosome)，即微管组织中心(microtubule organizing center，MTOC)是细胞内一个无膜包被的小体积细胞器，其在细胞核外近处大约占据1μm的体积。在大多数脊椎动物细胞中，一个中心体包含一对中心粒，周围环绕着浓密的无定型区域。中心粒主要由α-微管蛋白和β-微管蛋白构成的微管组成。Γ-微管蛋白(Tubulin-γ)是一个中心粒相关蛋白质，为微管提供实际成核源头复合体的一部分。有研究表明，Tubulin-γ的异常表达与肿瘤癌变有关。
　　 本研究拟通过采用免疫组织化学染色链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法（SP法）检测正常乳腺组织(NB)、导管原位癌(DCIS)和乳腺浸润性导管癌(IDC NOS)组织中EGFR、HER-2/Neu、K-ras和中心体相关微管蛋白γ(Tubulin-γ)的表达情况，探讨上述指标在乳腺癌发生中的可能作用。此外，通过探讨EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ在乳腺导管内乳头状瘤（intraductal papilloma of the breast，IDP）中的表达情况，以期进一步探讨其生物学行为。
　　 方法：采用免疫组织化学SP法检测30例正常乳腺组织(NB)、50例导管原位癌(DCIS)和50例乳腺浸润性导管癌(IDC NOS)石蜡标本中EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ的表达情况，分析丁其临床病理意义。采用SP法检测50例乳腺导管内乳头状瘤(IDP)石蜡标本中EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ的表达情况，拟探讨IDP的生物学行为。
　　 实验数据采用Krauskal-Wallis和spearman等统计学方法进行处理和分析。
　　 结果：
　　 1、EGFR在各组组织中的表达情况
　　 EGFR免疫组化阳性反应位于细胞膜和细胞浆，呈棕黄色或棕褐色颗粒状。NB组织中EGFR的阳性表达率为3％，DCIS和IDCNOS组中EGFR的阳性表达率均高于正常乳腺（60％和74％，x2=43.84，p＜0.01）。但DCIS和IDCNOS组间比较EGFR的阳性表达率无显著性差异(Z=-1.052，P=0.216)。
　　 2、Her-2/Neu在各组组织中的表达情况
　　 正常乳腺组织中未见Her-2/Neu在细胞膜的阳性表达，而Her-2在IDCNOS和DCIS组中的阳性表达率分别为62％和56％，明显高于正常乳腺（x2=37.38，p＜0.01）。Her-2/Neu在IDCNOS组和DCIS组之间的阳性表达率无明显差异（Z=-1.354，P=0.176）。
　　 3、K-ras在各组组织中的表达情况
　　 K-ras免疫组化阳性染色位于细胞核，呈棕黄色或棕褐色颗粒状。NB组中未检测到K-ras阳性病例。DCIS和IDCNOS组中K-ras的阳性表达率分别为62％和74％，明显高于NB组（x2=38.7，p＜0.01）。DCIS和IDCNOS组间比较K-ras的阳性表达率无显著性差异(Z=-0.692，P=0.489)。
　　 4、Tubulin-γ在各组组织中的表达情况
　　 Tubulin-γ免疫组化阳性反应位于细胞浆，呈棕黄色或棕褐色颗粒状。Tubulin-γ在NB、DCIS和IDCNOS组织中的阳性表达率呈上升趋势，分别为13％、84％和88％(x2=40.4，p＜0.01)。IDCNOS组和DCIS组Tubulin-γ的阳性表达率均明显高于NB(Z=-6.215，P=0.000;Z=-5.549，P=0.000)，而IDCNOS组和DCIS组之间Tubulin-γ的阳性表达率无显著性特征(Z=-1.336，P=0.153)。
　　 5、EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ各组中表达的相关性研究
　　 在对各组乳腺组织中EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ表达水平的相关性研究过程中，除了IDCNOS中EGFR和Her-2/Neu的表达呈正相关外(R=1，P＜0.01)，未发现其它指标之间存在明显的相关性。
　　 6、IDP中EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ的表达情况
　　 EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ在IDP组织中的阳性表达率分别为6％、0％、6％和38％，在NB组中分别为3％、0％、0％和13％，两组间差异均无显著性(Z=0.526，P=0.599;Z=-1.336，P=0.153;Z=-1.359，P=0.174)。EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ在IDP组织中的阳性表达率与IDC NOS组和DCIS组相比呈明显较低水平，且该差异均呈显著性特征。其统计学结果分别为EGFR(Z=-5.445，P=0.000;Z=-6.449，P=0.000);Her-2/Neu(Z=-7.188,P=0.000;Z=-6.710,P=0.000);K-ras(Z=-5.445,P=0.000;Z=-5.898,P=0.000);Tubulin-y(Z=-6.155,P=0.000;Z=-3.191，P=0.000)。
　　 结论：
　　 1.EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ在DCIS和IDCNOS组织中均呈阳性表达，且明显高于NB组织，提示EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ的高表达与乳腺癌发生有关。
　　 2.EGFR、Her-2/Neu、K-ras和Tubulin-γ在DCIS和IDCNOS组织中的表达没有显著差异，提示上述基因的异常表达可能与DCIS向浸润性癌的发展没有明显关系。
　　 3.IDP组织中EGFR、K-ras和Tubulin-γ的表达阳性率与NB组相似，显著低于IDCNOS和DCIS组织的研究结果，提示IDP组织增生与癌性增殖机制之间尚存在差异，可能属良性增殖范畴。

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文摘

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EGFR、Her-2/Neu、 K-ras和Tubulin-γ在乳腺癌前病变及乳腺癌中的表达研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 中心体与恶性肿瘤

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