石家庄地区中老年人APOE、LDLR和ER-α基因多态性与血清胆固醇水平的相关性研究

摘要

目的：阿尔茨海默病（Alzheimerdisease，AD）是以神经细胞外Aβ蛋白聚集形成老年斑，脑神经细胞内tau蛋白异常聚集形成神经元纤维缠结，脑萎缩为主要病理特征的神经退行性疾病。医学界普遍认为AD的发生发展受遗传因素和环境因素等多种因素的影响。但是，AD的确切发病机制尚不清楚，也没有十分有效的治疗方法。到目前为止AD的基因遗传学研究大约发现了350个基因可能与迟发性AD有相关性。在这之中APOE4等位基因已经被医学界认可是AD的易感基因。此外ER-α和LDLR基因的多态性也可能与AD的发生关系密切。
　　 另一方面科学界也在努力研究AD的早期诊断，这包括血清生物标志物诊断，脑脊液生物标志物诊断，PET，CT等等，但这些方面进展缓慢。尽管如此，AD的血清学研究依然在发展，已有一些研究证实中年期血清总胆固醇升高是AD发病的风险因素之一。
　　 本研究旨在利用PCR-RFLP法对石家庄社区居住的普通健康中老年人进行AD相关基因APOE，ER-α，LDLR的基因多态性分析并联系血糖、血脂、血胆固醇，HDL-Ch，LDL-Ch，VLDL-Ch及记忆能力(MMSE)减退状况，试分析AD相关基因的基因多态性，血中生物学标志物水平及MMSE分数之间的相关性，为临床早期诊断AD高危人群和预防AD提供一些帮助。
　　 方法：
　　 1.选择研究对象：
　　 河北省石家庄市社区内居住的45岁以上普通健康中老年人群随机抽样201名志愿者。均在石家庄居住20年以上，其中男性52名，女性149名。
　　 2.问卷调查：
　　 对研究对象进行一般情况调查及简短精神记忆量表MMSE问卷调查。
　　 3.血清生物标志物水平测定：
　　 抽取研究对象外周静脉血，使用试剂盒测定血清中血糖，甘油三酯，总胆固醇。使用全自动血生化分析仪测定HDL-Ch，LDL-Ch，VLDL-Ch含量。
　　 4.模板DNA的提取及鉴定：
　　 抽取研究对象外周静脉血，采用葡聚糖沉淀法从全血白细胞中提取模板DNA。测定模板DNA的OD260与OD280分析浓度与纯度，OD260/OD280大约在1.8到1.9范围内，为高质量DNA模板。
　　 5.目的基因的PCR扩增与多态性分析：
　　 参照文献分别设计APOE基因，ER-α基因，LDLR基因的引物并进行PCR扩增。利用多聚酶链反应限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RLFP)分析技术分别分析APOE基因的HhaⅠ多态性，LDLR基因的AvaⅡ多态性，ER-α基因的XbaⅠ及PvuⅡ多态性。
　　 6.统计：
　　 使用SPSS17.0软件采用非参数检验(nonparametrictest)分析各基因的多态性与血清学生物学标志物水平及MMSE分数的相关性。数据用M(QR)表示。
　　 结果：
　　 1.APOE基因多态性与血清生物学指标相关性研究时发现：60岁以上男性亚组中APOE基因E3等位基因组血清总胆固醇水平高于E2等位基因组(P=0.018)及E3/E3基因型血清总胆固醇水平高于E2/E3基因型(p=0.041)；全年龄，全性别亚组中APOE基因E2等位基因血清VLDL-Ch水平高于E3等位基因(p=0.029)及E2/E3基因型VLDL-Ch水平高于E3/E3基因型(p=0.044)。
　　 2.LDLR基因多态性与血清生物学指标相关性研究时发现：60岁以上全性别亚组中LDLR基因aa基因型LDL-Ch水平高于Aa基因型(p=0.034)。LDLR基因多态性与MMSE分数相关性研究时发现：60岁以上全性别亚组中Aa基因型MMSE分数高于aa型(p=0.028)及A等位基因MMSE分数高于a等位基因(P=0.014＜0.05)。
　　 3.ER-α基因多态性与血清生物学指标相关性研究时发现：60岁以下女性亚组中ER-α基因(XbaⅠ)x等位基因血清甘油三酯水平高于X等位基因(p=0.027);60岁以下全性别亚组中ER-α基因(PvuⅡ)p等位基因LDL-Ch水平高于P等位基因(P=0.048)；60岁以上男性亚组中ER-α基因(PvuⅡ)p等位基因HDL-Ch水平高低于P等位基因(P=0.018)。
　　 结论：石家庄市社区内，某些不同年龄和性别的普通中老年人群组中，APOE，LDLR，ER-α(PvuⅡ)基因多态性与血胆固醇水平之间存在一定的相关性，提示这些基因的多态性与血胆固醇水平相关联，或者血胆固醇水平受到多个基因的影响，它们之间关系的深入研究或许将为AD的高风险人群预测提供帮助。

目录

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石家庄地区中老年人APOE、LDLR和ER-a基因多态性与血清胆固醇水平的相关性研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 阿尔茨海默病的遗传基因研究进展

参考文献

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