细胞因子佐剂IL-23、IL-27对RSV重组蛋白疫苗安全性和保护性的影响

摘要

目的：自从呼吸道合胞病毒(RSV)被发现以来，一直是婴幼儿严重下呼吸道感染的重要病原。但目前尚无有效有效解决措施，WHO已将RSV疫苗确定为优先发展的疫苗。G:125-225-F/M2:81-95(G1F/M2)是一种前期研制的RSV重组亚单位蛋白疫苗，包括含CX3C基序和中和表位的G:125-225(G1)蛋白片段和RSV基质蛋白的CTL表位M2:81-95将其免疫小鼠后产生了Th1/Th2混合型的免疫应答，但Th2应答仍占优势，RSV攻击后，肺部的炎症性病理损伤仍未完全解决。本实验用细胞因子佐剂IL-23、IL-27单独或联合以及同CpG佐剂联合与疫苗一起免疫小鼠，观察IL-23、IL-27单独或联合其他佐剂使用对G1F/M2的免疫病理的调节作用。
　　 方法：
　　 1.大量提取pcDNA3.1/myc-HisB质粒、pcDNA3.1/myc-HisB-mIL-23质粒、pcDNA3.1/myc-HisB-mIL-27质粒。E.coil表达、亲和层析纯化G1F/M2蛋白。
　　 2.培养RSV并测定TCID503动物实验3.1用佐剂和G1F/M2共同免疫小鼠：
　　 将6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为8组，每组6只，分别为：(1)IL-23+G1F/M2组，(2)IL-27+G1F/M2组，(3)IL-23+IL-27+G1F/M2组，(4)pcDNA3.1+G1F/M2组，(5)IL-23+CpG2216+G1F/M2组，(6)IL-27+CpG2216+G1F/M2组，(7)G1F/M2组，(8)PBS组。质粒提前两天经肌肉注射，蛋白经腹腔注射，共免疫3次，每次间隔10天。每次免疫后10天取血，第三次为14天，分离血清用间接ELISA法测定三次免疫后的血清IgG抗体效价，观察不同组合对体液免疫的影响。第3次免疫后2周处死小鼠取脾细胞，LDH法检测CTL活性：ELISPOT法检测分泌IL-4和IFN-γ的淋巴细胞水平；流式细胞仪检测CD4+、CD8+细胞的效应记忆和中央记忆致的。总之，组合使用佐剂产生的结果明显优于单独使用佐剂，这可能与佐剂之间产生了协同作用有关。

目录

文摘

英文文摘

细胞因子佐剂IL-23、IL-27对RSV重组蛋白疫苗安全性和保护性的影响

引言

第一部分 IL-23、IL-27对RSV重组蛋白疫苗免疫原性的影响

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分 IL-23、IL-27对RSV重组蛋白疫苗保护性和安全性的影响

前言

材料与方法

结果

附图

讨论

小结

参考文献

结论

综述 Pattern recognition receptors-mediated innate immune recognition of and innate immune response to human respiratory syncytial virus

Reference

致谢

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