Gli1在喉癌组织中的表达及其与PCNA表达和肿瘤微血管形成的关系

摘要

目的：喉鳞状细胞癌(简称喉癌)是头颈部常见的恶性肿瘤，占头颈部肿瘤的13.9％。研究喉癌的发生、发展、侵袭和转移机制以及从中探寻早期诊断和基因治疗方法一直是头颈肿瘤研究的热点。许多研究已经表明在胚胎干细胞发育中发挥作用的细胞信号转导通路，在肿瘤细胞中重新激活并在这些肿瘤的恶性无限性增殖以及侵袭和转移中有重要作用，例如Hedgehog(Hh)信号转导通路。Gli1蛋白是Hh信号转导通路中的一种核转录因子，在基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌、小细胞肺癌、胃癌、宫颈癌等多种肿瘤组织中高表达，与这些肿瘤的分化程度以及侵袭和转移有关。Gli1蛋白在喉癌中的表达以及与喉癌增殖活性以及侵袭性的关系尚未见报道。本研究将采用免疫组织化学的方法检测喉鳞状细胞癌中Gli1、核增殖抗原PCNA和CD34蛋白的表达，并计数瘤内微血管密度(microvessel density，MVD)，旨在探讨Gli1蛋白在喉癌组织中的表达与肿瘤恶性增殖活性、微血管形成以及喉癌临床及病理因素之间的关系，为喉癌的诊断和治疗提供新思路。
　　 方法：为2006年7月～2010年3月在白求恩国际和平医院耳鼻咽喉-头颈外科接受手术的喉癌患者的石蜡标本40例，癌旁喉粘膜组织10例(取自全喉切除患者，所有患者术前均未进行化学治疗和放射治疗。采用免疫组织化学方法染色(SP法)，检测Gli1、PCNA、CD34蛋白在40例喉癌组织、10例喉癌旁粘膜组织中的表达情况，并计数瘤内微血管密度(MVD)。对Gli1在喉癌中的表达与PCNA表达、MVD以及喉癌临床病理因素的关系进行统计分析。
　　 结果：1.免疫组化SP法染色后可见癌旁喉黏膜均可检测到Gli1蛋白表达，其阳性表达评分为1.50±0.70。在40例喉癌组织中均有Gli1蛋白的表达，其阳性表达评分为4.60±3.52，经两样本的t检验分析显示，喉癌Gli1蛋白表达较癌旁粘膜显著增高，两者有极显著差异，p<0.01。
　　 2.Gli1蛋白表达与患者年龄(p=0.572)、性别(p=0.837)、肿瘤生长部位(p=0.947)、肿瘤T分期(p=0.560)无相关性。而与病理分级(p=0.000)、有无淋巴结转移(p=0.001)有关。3.PCNA在癌旁正常喉黏膜鳞状上皮中仅局限的表达于黏膜基底层，在喉癌组织中呈巢状、局灶状或呈片状分布，PCNA蛋白表达与肿瘤T分期(p=0.157)无相关性。而与病理分级(p=0.012)、有无淋巴结转移(p=0.000)有关。4.相关分析显示Glil表达与PCNA阳性表达呈明显正相关，相关系数为0.487，p<0.001。5.喉癌中MVD在有颈淋巴结转移组明显高于无颈淋巴结转移组(p=0.000)。喉癌MVD与Gli1蛋白表达呈显著正直线相关，r=0.541，p=0.000。
　　 结论：1.Gli1蛋白在喉癌组织中高表达，而在癌旁粘膜中低表达，两者之间存在显著差异。Gli1蛋白的表达程度与肿瘤临床病理因素有关，与患者年龄、性别、肿瘤临床T分期无相关性，而与喉癌病理分级及颈部淋巴转移有关，随着肿瘤恶性程度的增加及颈部淋巴结转移的出现，喉癌Gli1蛋白的表达呈增高趋势，表明Gli1蛋白在喉鳞癌发生、发展以及浸润转移中起着一定的作用。2.PCNA蛋白在喉癌中高表达，表达程度随着肿瘤恶性程度的增加及颈部淋巴结转移的出现呈增高趋势。3.在喉癌组织中Gli1与PCNA蛋白表达之间存在明显正相关，说明Gli1的表达促进了肿瘤细胞的增殖。4.喉癌中MVD在有颈淋巴结转移组明显高于无颈淋巴结转移组，说明肿瘤微血管形成促进了喉癌的侵袭与转移。喉癌MVD与Gli1蛋白表达呈明显正直线相关，说明Gli1蛋白通过促进肿瘤微血管形成进而促进喉癌的侵袭与转移。