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雌激素对盆底功能障碍性疾病患者阴道壁成纤维细胞在应力前后增殖和弹性蛋白基因表达变化的影响

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研究论文 雌激素对盆底功能障碍性疾病患者阴道壁成纤维细胞在应力前后增殖和弹性蛋白基因表达变化的影响

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 弹性蛋白和Fibulin-5与盆底功能障碍性疾病

致谢

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摘要

目的
   1.了解阴道壁成纤维细胞应力后弹性蛋白(Elastin)mRNA表达水平的变化;
   2.了解阴道壁成纤维细胞应力前后加入雌激素增值率的变化;
   3.了解阴道壁成纤维细胞在应力后加入雌激素的作用下弹性蛋白mRNA表达水平的变化;
   4探讨力在盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)发病中的作用。
   方法:
   选取2009年1O月至2010年9月河北医科大学附属第二医院妇产科收治的因PFD需手术治疗的患者12例,所有患者术前均参照美国盆腔器官脱垂定量分期法(pelvic organ prolaps quantitation,POP-Q)评分至少一个部位脱垂为Ⅲ、Ⅳ期。其中子宫脱垂合并阴道前壁脱垂5例,子宫脱垂合并阴道后壁脱垂3例,子宫脱垂合并阴道前后壁脱垂4例,另外患者中单纯POP9例,POP合并SUI3例。患者平均年龄为58.3±9.6岁,产次为2.9±1.2,体重指数为23.78±1.90。所有患者均排除呼吸系统、心血管系统和皮肤病等结缔组织疾病,所有患者术前3个月均未服用过雌激素类药物。于手术中取阴道壁组织,对其进行原代培养,选取第3-5代细胞作为实验对象,用Flexcercell4000柔性基底拉伸加载系统对细胞施加应力,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定应力前后Elastin mRNA的表达量,并取应力后细胞加入不同浓度17β-雌二醇,再测定Elastin mRNA表达量,并与应力前做比较;对应力前后细胞分别加入不同浓度17β-雌二醇,用MTT方法测定细胞增殖性,并进行比较;
   结果:
   1.在体外培养条件下,应力后成纤维细胞Elastin mRNA表达量为0.4960±0.1928;应力前表达量为O.1862±0.0848,应力后表达量增加。两组比较统计学差异(P<0.05),说明应力对Elastin mRNA的表达有促进作用:
   2.在体外培养下,应力前细胞加入终浓度为1×10-4mol/L、l×10-66mol/L、1×10-8mol/L、1×10-10mol/L的17β-雌二醇后增殖率分别为0.54、0.38、0.38、0.23;对应力后细胞也分别加入与应力前相同浓度的雌二醇,增值率分别为O.17、O.10、0.07、0.06,均比前组下降。比较两组数据,说明雌二醇对阴道壁成纤维细胞有促进增殖作用,不同浓度的雌二醇对阴道壁成纤维细胞的增殖作用不同,P=0.02<0.05,有统计学意义,且随着药物浓度的加大增殖率也增大,其中1×10-4mol/L组对细胞的增殖率最大;施加应力与不施加应力对阴道壁成纤维细胞的增殖作用显著不同,P<0.01,有统计学意义;
   3.在体外培养条件下,应力后加入雌二醇,Elastin mRNA的表达量为0.6437±O.1100,比应力后不加雌二醇组高,两组比较统计学差异(P<0.05),说明雌二醇对成纤维细胞应力后Elastin mRNA的表达有促进作用。
   结论:
   1.阴道壁成纤维细胞应力后细胞生长方向与受力方向一致,并变得较狭长;
   2.加力后阴道壁成纤维细胞Elastin mRNA的表达量比应力前增多,说明应力对E1astin mRNA的表达有促进作用,阴道壁成纤维细胞对应力做出反应,通过增加弹性蛋白的合成和分泌来对抗力的作用,阻止脱垂的发生;
   3.应力后加入雌二醇,Elastin mRNA的表达量比应力后不加雌二醇高,说明雌激素对阴道壁成纤维细胞对抗力的影响有协同作用;
   4.雌二醇对阴道壁成纤维细胞的增殖有促进作用,而应力对阴道壁成纤维细胞的增殖有抑制作用。

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