阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种年龄相关的痴呆,最常发生于老年及老年前期,也是目前神经退行性疾病及痴呆的最常见原因。典型临床表现为进行性认知功能障碍和神经精神及行为损害。患者脑部有进行性的边缘系统及相关区域的新皮质选择性神经元缺失。其特征性的组织病理改变为神经炎性斑或老年斑(主要为淀粉样肽)的形成和异常细胞骨架蛋白的聚集(神经纤维缠结,NTFs)。我国60岁以上老年人口有1.2亿,痴呆患病率为3～8％,其中60%以上为阿尔茨海默病。 帕金森病(Parkinson's disease,PD),又名震颤麻痹(shaking palsy,paralysis agitans)于1817年由英国医生James Parkinson首先系统的进行描述故而得名,是第二位最常见的神经系统变性疾病,患病率仅次于阿尔茨海默病,全世界大约有600万PD患者。PD的发病年龄在40～70岁之间,其中,50～60岁为发病高峰。我国55岁～65岁人群患病率为约1%,并随着年龄增高而升高,男性稍高于女性。 随着老年人口的快速增长,老龄化的社会问题成为世界各国关注的焦点,阿尔茨海默病和帕金森病的发病率也逐年上升。AD已成为继肿瘤、心血管疾病、脑血管疾病之后导致死亡的第四位疾病。阿尔茨海默病和帕金森病严重影响患者的生活质量,晚期患者生活自理能力严重丧失,极大地增加了社会和家庭的经济负担和护理负担。虽然引起AD和PD发病的病理机制尚未完全阐明,但诸多研究结果显示,神经细胞凋亡在AD和PD的发病机制中占有重要地位。而且,有研究表明AD的细胞凋亡发生在疾病的早期,不仅局限于神经元,而且体现在外周血淋巴细胞和成纤维细胞。近期也有资料显示,PD的细胞凋亡除发生在脑神经元外,在外周血淋巴细胞中也有发现。 P38MAPK和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK.)的重要家族成员,为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在哺乳动物细胞内广泛表达。P38MAPK和JNK信号通路通常由紫外线、渗透压变化、各种细胞因子和生理应激等激活,合称为MAPK应激信号通路,它们除了在介导炎症、应激等多种细胞反应中起着重要的作用外,还与细胞的生长、发育和分化密切相关。越来越多的研究亦发现,P38MAPK和JNK的表达和活性的变化,可以有效调节和阻断关键的信号通路,调控细胞凋亡。 外周血采集方便,为研究细胞凋亡事件在AD、PD发病机制中的作用和寻找可干预的靶点提供了方便有用的模型。如果能从外周血中获得简便、有效的标志物将对AD的诊断及治疗产生重要意义,但至今尚无这样的标志物为临床所应用。 目的:1本研究从蛋白水平出发,研究AD和PD患者淋巴细胞中应激活化蛋白激酶P38MAPK和JNK的表达情况,为筛查疾病的可干预靶点提供细胞模型。 2在AD外周血淋巴细胞中研究调控细胞凋亡的相关激酶P38MAPK及JNK的表达及活化水平,寻找诊断AD的特异性外周标记物。 3同时,对年龄和教育程度相匹配的正常人及帕金森病患者外周血淋巴细胞中P38MAPK.和JNK的表达及其活性进行检测,从而明确该指标的特异性。 方法:1分别根据美国国立神经病语言障碍卒中研究所和阿尔茨海默病及相关疾病学会(the national institute of neurological and communicativedisorders and stroke and the Alzheimer's disease and related disordersassociation,NINCDS.ADRDA)很可能AD的诊断标准和2006年中华医学会公布的PD诊断标准筛选病人,收集2010年9月至2011年12月河北医科大学第二医院神经内科门诊就诊的很可能AD患者20例、PD患者20例、正常对照组20例,征得入选者或其监护者同意,利用简易精神状态量表(MMSE)、临床痴呆量表(CDR)等综合评价认知障碍的程度并记录入选者的个人信息。 2所有入选者均于上午9:00～11:00抽取15ml新鲜静脉血置于抗凝管中,用Ficoll密度梯度离心法提取外周血淋巴细胞。 3从已提取的外周血淋巴细胞中提取总蛋白,采用Western Blotting技术,检测其中P38MAPK、P-P38MAPK、JNK及P-JNK的蛋白表达水平。 4统计学处理。采用SPSS17.0统计软件包进行处理。 结果:与正常对照组相比,AD和PD患者外周血淋巴细胞中P-P38MAPK、P-JNK蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05),AD和PD组差异无统计学意义(p＞0.05);而AD和PD患者外周血淋巴细胞中总P38MAPK、总JNK蛋白表达水平虽较正常对照组均升高,但差异均无统计学意义(P＞0.05)。 结论:1本研究从蛋白水平出发,验证了AD和PD患者淋巴细胞中P38MAPK和JNK的存在及表达,可能为筛查疾病的可干预靶点提供了一个方便有用的细胞模型。 2在AD中,P38MAPK和JNK信号通路表达异常不仅体现在中枢神经系统,而且在外周血淋巴细胞中也可检测到,有可能成为AD诊断及治疗的外周标记物。 3 P38MAPK和JNK信号通路表达异常在PD患者淋巴细胞中也检测到,证实其不是某种疾病所特有,而是可能在多种神经系统变性疾病中存在。
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