高果糖饮食对大鼠肝脏ChREBP、SREBP-1c表达的影响及其意义

摘要

目的：观察高果糖饮食喂养大鼠肝脏碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate responsive element binding-protein，ChREBP)、固醇调节元件结合蛋白－1c(sterol regulatory element binding protein-1c，SREBP－1c)及其靶基因的mRNA和蛋白的表达，探讨高果糖饮食对大鼠肝脏脂质合成的影响。
　　方法：48只雄性健康Wistar大鼠(由河北医科大学实验动物中心提供)随机分为两组：正常对照组(NC)24只、高果糖饮食组(HF)24只。正常对照组给予基础饲料，热量组成：碳水化合物65.5％；蛋白24.2％；脂肪10.3％；高果糖组给予高果糖饮食，热量组成：碳水化合物77％(果糖34.5％)蛋白16％；脂肪7％。分别于喂养8周、16周末分批处死各组大鼠，留取血及肝脏组织标本。每组大鼠处死前禁食12小时过夜，行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)、清醒状态下高胰岛素－正葡萄糖钳夹试验，计算葡萄糖曲线下面积(AUCglu)、葡萄糖输注率(GIR)；测量大鼠体重及肝脏湿重，计算肝指数(肝重与体重的比值)；颈动脉取血，分离血清，测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、游离脂肪酸(FFA)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)；肝组织病理学检查判断肝脂质沉积程度；并测定肝组织中甘油三酯含量，检测肝脏固醇调节元件结合蛋白－1c(SREBP－1c)、碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)及脂质合成酶类脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的mRNA及蛋白的表达。
　　结果：(1)大鼠体重、肝指数、生化：
　　①8周、16周两组大鼠体重无显著差异(P>0.05)，HF组大鼠肝指数较NC组明显升高(P<0.01)；
　　②8周、16周HF组大鼠血清ALT、AST、TG及TC水平较NC组显著升高(P<0.01)；
　　(2)口服葡萄糖耐量试验(OGTT)：8周、16周HF组大鼠葡萄糖曲线下面积(AUCglu)较NC组显著增加(P<0.01)；
　　(3)空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS)及葡萄糖输注率(GIR)：8周、16周HF组大鼠FBG、FINS较NC组明显升高(P<0.01)，GIR较NC组明显降低(P<0.01)；
　　(4)游离脂肪酸(FFA)：8周、16周HF组大鼠血清FFA水平较NC组显著增加(P<0.01)；
　　(5)肝脏甘油三酯(TG)水平：8周、16周HF组大鼠肝脏TG较NC组显著增加(P<0.01)；
　　(6)肝组织病理学检查：8周HF组大鼠肝细胞出现明显的脂肪变性及脂质沉积，16周HF组大鼠肝细胞脂肪变性及脂质沉积更为明显；
　　(7)ChREBP、SREBP-1c、FAS、ACC mRNA表达及蛋白水平：8周、16周HF组大鼠ChREBP、SREBP-1c、FAS、ACC mRNA表达及蛋白水平均较NC组显著增高(P<0.01)，且16周较8周进一步增高(P<0.01)。
　　结论：1.高果糖喂养导致大鼠高脂血症、胰岛素抵抗；
　　2.高果糖喂养导致大鼠肝细胞脂肪变性，肝脏脂质沉积；
　　3.高果糖喂养大鼠肝脏ChREBP、SREBP-1c及其靶基因FAS、ACC的mRNA及蛋白表达增加，并随时间延长，增加更明显，从而使肝脏脂质合成增加，促进肝脏脂质沉积。