黄芩苷对大鼠肺成纤维细胞及肌成纤维细胞CTGF和α-SMA表达的影响

摘要

目的:肺纤维化的病理特点是肺肌成纤维细胞异常增多，过度的细胞外基质沉积。α-平滑肌肌动蛋白(smoothmuscleactin，α-SMA)是肌成纤维细胞(myofibroblast，MFB)的标志物。转化生长因子-β1(transformingrowthfactor-beta，TGF-β1)是刺激成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的主要细胞因子。结缔组织生长因子（connectivetissuegrowthfactor，CTGF）是TGF-β1的下游因子。肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞时，CTGF表达明显增加。黄芩苷(Baicalin)是从中草药黄芩中分离出来的一种黄酮类化合物，具有抗纤维化作用。但黄芩苷对于离体肺成纤维细胞和肌成纤维细胞CTGF及α-SMA蛋白表达的影响目前尚未见报道。因此，本实验通过离体培养大鼠肺成纤维细胞及肌成纤维细胞，观察黄芩苷对肺成纤维细胞及肺肌成纤维细胞CTGF及α-SMA蛋白表达的影响，为黄芩苷在临床肺纤维化中的防治提供研究资料。
　　 方法:体外分离培养原代雄性SD大鼠(150-170g)肺成纤维细胞;用TGF-β诱导肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞;MTT法测定黄芩苷对肺成纤维细胞及肌成纤维细胞存活率的影响;WesternBlot法测定肺成纤维细胞及肌成纤维细胞CTGF及α-SMA的蛋白表达。
　　 结果:
　　 1黄芩苷对肺成纤维细胞及肌成纤维细胞存活率的影响
　　 肺成纤维细胞是指正常培养的无TGF-β诱导的肺成纤维细胞，肌成纤维细胞为肺成纤维细胞经TGF-β诱导48h且α-SMA表达增加的细胞，对照组为无药物干扰的。与对照组(0μmol/L)相比，10、20和40μmol/L的黄芩苷对肺成纤维细胞及肌成纤维细胞的存活率均无明显影响(P＞0.05)，80、160μmol/L浓度的黄芩苷抑制肺成纤维细胞及肌成纤维细胞的存活率(P＜0.01)。提示10-40μmol/L浓度的黄芩苷对肺成纤维细胞及肌成纤维细胞无明显毒性作用。
　　 2黄芩苷对肺成纤维细胞CTGF及α-SMA蛋白表达的影响
　　 与对照组(0μmol/L)相比，10、20、40μmol/L浓度的黄芩苷对肺成纤维细胞CTGF及α-SMA蛋白表达均无统计学意义(P＞0.05)，80、160μmol/L浓度的黄芩苷则抑制肺成纤维细胞CTGF及α-SMA蛋白表达(P＜0.01)。这提示10-40μmol/L黄芩苷既不增加肺成纤维细胞CTGF表达也不诱导其向肌成纤维细胞转化，80-160μmol/L黄芩苷则抑制其表达。
　　 3黄芩苷对肺肌成纤维细胞CTGF及α-SMA蛋白表达的影响
　　 TGF-β诱导后的细胞与正常肺纤维细胞相比，CTGF及α-SMA蛋白表达明显升高，提示体外肌成纤维细胞诱导成功。与对照组相比(0μmol/L)，10、20、40、80、160μmol/L浓度的黄芩苷呈剂量依赖性的抑制肌成纤维细胞CTGF及α-SMA蛋白表达(P＜0.01)，提示黄芩苷呈剂量依赖性促进肌成纤维细胞去分化为成纤维细胞。
　　 结论:
　　 110-40μmol/L浓度的黄芩苷对肺成纤维细胞及肌成纤维细胞存活率无影响，80、160μmol/L浓度的黄芩苷则表现出毒性作用。
　　 210-40μmol/L浓度的黄芩苷既不增加肺成纤维细胞CTGF表达也不诱导其向肌成纤维细胞转化，80-160μmol/L浓度的黄芩苷抑制肺成纤维细胞CTGF及α-SMA蛋白表达。
　　 3黄芩苷呈剂量依赖性的(10、20、40、80、160μmol/L)抑制肌成纤维细胞CTGF表达，并促进其去分化为成纤维细胞。

目录

声明

摘要

英文缩写

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 CTGF与器官纤维化的关系

致谢

个人简历