住院非腹泻儿童携带艰难梭菌的流行病学特征

摘要

目的:艰难梭菌属严格厌氧菌，是医院获得性腹泻的常见病原菌，其形成的特征性芽孢对外界环境的抵抗力强，在疾病的传播中发挥着重要作用。进入机体后可不引起临床症状呈定植状态，在儿童体内有很高的定植率，国外对住院儿童艰难梭菌的携带情况已有相关研究，但国内尚缺乏相关数据。且由于其培养条件苛刻，国内只有少数实验室能够对其进行培养，快速培养艰难梭菌的方法对于临床实验室明确诊断艰难梭菌感染(ClostridiumdifficileinfectionCDI)至关重要。由于无症状儿童在艰难梭菌的传播中发挥着重要作用，因此了解本地区儿童携带菌株的相关特征，对于CDI的预防有重要意义。本研究拟建立一种适合临床实验室使用的快速培养方法，并对石家庄地区住院非腹泻儿童携带的艰难梭菌进行分离培养，了解艰难梭菌在儿童体内的定植情况，同时与成人菌株进行同源性分析，了解同型菌株在儿童与成人间的传播情况。
　　 方法:对196份粪便标本进行改良快速肉汤孵育法（本实验室建立）、传统富集芽孢培养法、乙醇直接处理法、乙醇加牛磺胆酸钠法的比较，通过阳性率的比较找出最佳培养方法。并对2011年10月-2012年6月石家庄地区三所医院中0-18岁住院非腹泻儿童的601份便标本进行菌株筛选;用PCR的方法检测其毒素基因及核糖体分型，分型结果用NtsysPC2.0软件进行分析;将儿童分离到的菌株与同地区成人CDI患者的菌株进行比对，对同源性进行分析。
　　 结果:通过比较发现我实验室建立的改良快速肉汤孵育法与其他3种培养方法的阳性率无明显差别（38.3％，37.1％，35.2％，36.1％，P＞0.05）。用快速肉汤孵育法在601份儿童粪便标本中共分离培养出艰难梭菌152株，总携带率为25.3％(152/601)，产毒株携带率为18.3％(110/601);2岁以下婴儿与2-18岁儿童携带率分别为20.6％(81/394)、34.3％(71/207)，2岁以下婴儿对产毒株的携带率较2-18岁儿童低(14.7％vs.25.1％，P＜0.05)。PCR核糖体分型共分为23个不同的型别，其中六种PR型别的菌株占82.2％(125/152)。成人艰难梭菌相关性腹泻（ClostridiumdifficiledifficileassociateddiarrheaCDAD）患者的12个型别除SⅩ、SⅪ（各1株）外，其余的10个型别在儿童中都有发现;
　　 结论:本实验室改良的快速肉汤孵育法适合临床实验室操作，为临床明确诊断CDI提供了极大的方便，可以作为一种经济有效的方法在临床艰难梭菌培养中推广。本地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的携带率与国外报道相似，但产毒株的携带率较高，且与引起成人CDI的菌株有同源性，提示艰难梭菌可在儿童与成人间相互传播，无症状儿童作为艰难梭菌及其芽孢的储存库污染医院内环境，对易感患者造成威胁。

目录

声明

摘要

引言

第一部分 艰难梭菌快速培养方法的建立

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分 住院非腹泻儿童艰难梭菌的携带率及核糖体分型

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

结论

综述 艰难梭菌在儿童中的定植与感染

致谢

个人简历