慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞与血清中ToII样受体及Th1/Th2/Th17型细胞因子的表达

摘要

目的:根据世界卫生组织最新统计数据显示，目前全世界慢性乙型肝炎的感染者大约有3.5亿人口，每年由此造成的死亡人数将近100万，而在我们国家有将近一亿的慢性乙型肝炎的感染者或乙肝病毒携带者。乙型肝炎是炎症性疾病的一种，它是由乙型肝炎病毒（HBV）的感染致病的，感染者不仅有淋巴组织中B细胞(B lymphocyte)和T细胞(T lymphocyte)的增殖分化，而且还表现有肝脏、脾脏、骨髓和淋巴结内巨噬细胞的增多，这些增高的免疫细胞可释放具有抗病毒作用的细胞因子造成局部长期的炎症反应。因此，这些炎症性的免疫细胞和因子在乙肝的感染、发展过程之中发挥着举足轻重的作用。
　　作为天然免疫系统中最重要的一类受体家族，Toll样受体(Toll likereceptors，TLRs)是近年来广受人们重视的一类模式识别受体，它作为一类重要的蛋白质分子不仅参与了非特异性免疫应答即天然免疫应答，而且还是连接特异和非特异性免疫应答的纽带。来源于微生物的具有保守结构的分子可以被作Toll样受体所识别，从而激活机体的固有免疫应答，继而激活适应性性免疫应答，共同清除病原体。所以Toll样受体在机体的免疫防御中起着关键的作用。本研究旨在考察慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中Toll样受体及一些细胞因子的表达情况。
　　方法:1收集2012年11月-2014年1月之间在衡水市人民医院就诊的慢性乙型肝炎患者34例为实验组，此组人员均排除了其他类型肝炎、梅毒密螺旋体特异性抗体阳性、艾滋病以及其他感染，仅为慢性乙型肝炎的感染者。其中男性患者22例，女性患者12例，年龄在18岁-64岁之间，平均年龄38.8岁。此外对照组则需要同期收集40例非乙肝的正常人血液，年龄在21岁-59岁之间，平均年龄36.7岁。
　　2采集实验组和正常对照组人员的新鲜全血，用肝素抗凝，立即分离单个核细胞，提取RNA，反转录为cDNA，用实时定量PCR技术检测PCR测的因子有TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR9、IRF-1、IRF-3、IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ。
　　同时收集两个组别血清用酶联免疫法测定IL-4、IL-17和IFN-γ。
　　结果:1 TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR9、IRF-3、IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ两组实验组与正常对照组相比较，测定水平均明显升高，具有显著性差异，P＜0.05。其中IL-10的表达量为正常对照组的1015倍，TLR2、TLR4、TLR9的表达量分别是正常对照组的189倍，211倍和282倍。
　　2 IRF-1两组实验组和正常对照组相比较，测定水平没有显著性差异，P＞0.05。
　　结论:慢性乙型肝炎患者的Toll样受体TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR9、细胞因子IFN-γ（Th1型）、细胞因子IL-10与IL-4（Th2型）、细胞因子IL-17(Th17型)以及转录因子IRF-3均比健康人显著升高，而转录因子IRF-1两组比较没有变化。这些结果提示:Toll样受体以及Th1/Th2/Th17型细胞因子对机体的免疫应答起着相当关键的调节作用，可能在乙肝的发展过程当中扮演着举足轻重的角色。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 实验方法

结果

1 临床资料分析

2 PCR结果分析

3 酶免结果

附图

讨论

结论

参考文献

综述 Toll样受体4的研究进展

致谢

个人简历