LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白在基底细胞样乳腺癌中的表达及临床意义

摘要

乳腺癌占女性全部恶性肿瘤的22％，是女性最常见的恶性肿瘤之一。女性患乳腺癌的危险随着生育年龄、生育数量以及饮食结构等因素的改变而开始增加，在发展中国家，这一现象更为突出。自上世纪70年代末开始，乳腺癌就一直是我国女性发病率最高的恶性肿瘤，并且发病率呈快速上升趋势，并且发病年龄越来越年轻化，对女性的健康和生命构成了严重的威胁。近年来，虽然随着医疗技术的进步，乳腺癌的死亡率明显下降，但复发和转移性乳腺癌仍然是临床医生面对的最大难题。
　　根据cDNA组织芯片基因表型将乳腺癌分为5种亚型。其中一种，的临床表现、病理组织学及免疫表型均颇具特征，并且具有最高的增殖指数和较差的临床预后，易早期发生远处转移和术后局部复发，约占全部乳腺癌的15％～25％，将其命名为基底细胞样乳腺癌(basal-like breastcarcinoma，BLBC)。多数乳腺癌患者采用术后内分泌治疗，因为基底细胞样乳腺癌中激素受体HER2、ER、PR三联阴性表达，且该类乳腺癌多伴有P53基因突变，因此对赫赛汀(Herceptin)靶向治疗和内分泌治疗无效。
　　上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是一个上皮细胞向间质细胞转化的过程，细胞内外环境的变化使上皮细胞间连接的重要成分缺失，间质细胞特有蛋白激活，从而促进肿瘤侵袭和转移。
　　赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase-like protein2，LOXL2)是赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase，LOX)家族中的一种依赖铜的分泌型胺氧化酶，能够催化细胞外基质中的胶原纤维与弹性纤维中的赖氨酸残基交联，维持细胞外基质结构的完整性。研究发现LOXL2在细胞衰老、细胞运动、分化及肿瘤发生、发展等生物学功能方面起重要作用。
　　钙粘附蛋白(cadherin)是一类主要介导细胞间粘附的钙依赖性跨膜蛋白，由主要分布于神经和肌肉组织中的N-cadherin、分布于胎盘组织中的P-cadherin和分布于上皮组织中的E-cadherin组成。大量研究结果证实，在肺癌、肠癌、胃癌、卵巢癌、肝癌等多种肿瘤中，肿瘤的分化、侵袭和转移与E-cadherin表达的缺失具有显著相关性。
　　Vimentin是一种重要的细胞骨架蛋白，广泛表达于间质细胞，如成纤维细胞、淋巴细胞等。Vimentin除了维持细胞完整性以外，还具有影响细胞粘附和迁移、参与细胞信号转导、调节细胞凋亡及调节基因组DNA表达的作用。正常上皮细胞不表达vimentin，但是在细胞恶变的情况下，可能表达于一些上皮源性的细胞，尤其是上皮源性肿瘤细胞。
　　目的:探讨LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白在基底细胞样乳腺癌中的表达及临床意义，探索BLBC的发生原因、发展过程及临床预后，探寻基底细胞样乳腺癌新的治疗靶点。
　　方法:采用免疫组织化学的方法检测LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白分别在66例癌旁正常乳腺组织、70例非基底细胞样乳腺癌及66例基底细胞样乳腺癌中的表达情况，分析其与BLBC临床病理特征的关系;分析各因子之间的相互关系，探寻LOXL2、E-cadherin、vimentin蛋白与基底细胞样乳腺癌之间的关系。免疫组化结果录入电脑，采用软件SPSS18.0进行统计分析，正常乳腺组织组、非BLBC组、BLBC组中的各项指标阳性率的组间比较、BLBC组中LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白的表达与各临床病理特征之间的关系均采用x2检验，LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白表达的相关分析采用spearman等级相关分析，采用α=0.05为检验标准、P＜0.05，差异具有统计学意义。
　　结果:
　　1 LOXL2的表达情况
　　LOXL2蛋白在正常乳腺组织、NON-BLBC组和BLBC组中的阳性表达率分别为21.2％(14/66)、51.4％(36/70)和74.2％(49/66)。LOXL2蛋白的阳性表达率在BLBC组和NON-BLBC组明显高于癌旁正常乳腺组织组(P＜0.05)，并且LOXL2在BLBC组的阳性表达率也显著高于NON-BLBC组（P＜0.05）。LOXL2蛋白在BLBC组中的表达与患者年龄及肿瘤大小无关（P＞0.05），而与乳腺癌的淋巴结转移及TNM分期相关（P＜0.05）。
　　2 E-cadherin蛋白的表达情况
　　E-cadherin蛋白在BLBC、NON-BLBC及癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率分别为24.2％(16/66)、41.4％(29/70)和71.2％(47/66)。BLBC组和NON-BLBC组E-cadherin蛋白的阳性表达率明显低于正常乳腺组织组(P＜0.05)，并且E-cadherin在BLBC组的阳性表达率也显著低于NON-BLBC组(P＜0.05)。E-cadherin蛋白在BLBC组中的表达与患者年龄及肿瘤大小无关(P＞0.05)，而与乳腺癌的淋巴结转移及TNM分期相关(P＜0.05)。
　　3 Vimentin蛋白的表达情况
　　Vimentin蛋白在BLBC、NON-BLBC及癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率分别为60.6％(40/66)、42.9％(30/70)和16.7％(11/66)。BLBC组和NON-BLBC组vimentin蛋白的阳性表达率明显高于正常乳腺组织组(P＜0.05)，并且vimentin蛋白在BLBC组的阳性表达率也显著高于NON-BLBC组(P＜0.05)。vimentin蛋白在BLBC组中的表达与患者年龄及肿瘤大小无关(P＞0.05)，而与乳腺癌的淋巴结转移及TNM分期相关(P＜0.05)。
　　4 LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白表达相关性分析
　　4.1 LOXL2与E-cadherin的相关性分析
　　在LOXL2阳性表达的49例BLBC中有6例E-cadherin阳性表达;而LOXL2阴性表达的17例中有10例呈E-cadherin阳性表达。统计学分析结果表明，LOXL2与E-cadherin蛋白在BLBC中的表达呈负相关关系(r=-0.475，P＜0.01)。
　　4.2 LOXL2与vimentin的相关性分析
　　BLBC中LOXL2呈阳性表达的49例中，vimentin的阳性表达率为71.42％(35/49)，而LOXL2呈阴性表达的17例中，vimentin的阳性表达率为29.41％(5/17)。LOXL2与vimentin蛋白的表达呈正相关关系（r=0.376，P＜0.01）。
　　4.3 E-cadherin与vimentin的相关性分析
　　在E-cadherin阳性的16例BLBC中有11例呈vimentin阳性表达，E-cadherin呈阴性表达的50例中有29例呈vimentin阳性表达。统计学分析结果表明，E-cadherin与vimentin蛋白在BLBC中的表达呈负相关关系(r=-0.506，P＜0.01)。
　　结论:
　　1 LOXL2蛋白在BLBC组中的表达明显高于非BLBC组和正常乳腺组织组，且在非BLBC组中的表达亦高于正常乳腺组织组，提示LOXL2可能是参与BLBC的发生、发展的重要分子;LOXL2蛋白的表达与基底细胞样乳腺癌的淋巴结转移及TNM分期密切相关，而与年龄及肿块大小无关，说明LOXL2可以促进BLBC的浸润和转移;
　　2 BLBC中E-cadherin的阳性表达率明显低于癌旁正常乳腺组织及NON-BLBC，组间比较差异具有统计学意义，且E-cadherin的表达与BLBC的淋巴结转移及TNM分期密切相关，提示BLBC的发生与E-cadherin的表达下调密切相关;且在BLBC的临床进展和转移过程中起重要作用。
　　3 vimentin在BLBC中过表达，与NON-BLBC及正常乳腺组织比较有显著差异，同时，vimtin的表达与BLBC的TNM分期及淋巴结转移情况有关，提示，vimentin的高表达在BLBC的浸润和转移中起着重要作用。
　　4 LOXL2可能作为BLBC分子治疗的新靶点。

目录

声明

摘要

英文缩写

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 基底细胞样乳腺癌的研究现状

致谢

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