通心络超微粉联合津力达颗粒对糖尿病大鼠的肾脏防治作用及其对TGf-β1/Smad信号转导通路的影响

摘要

目的:探讨通心络超微粉联合津力达颗粒对糖尿病大鼠的肾脏防治作用及其对TGF-β1/Smad信号转导通路的影响。
　　方法:采用清洁级、雄性SD大鼠80只，适应性喂养1周，随机选取10只为正常组（N组，Normal control group），余70只进行糖尿病(DM，diabetes)大鼠造模。进行造模大鼠给予高脂高糖饲料4周后，按35mg/kg的剂量尾静脉注射STZ，72小时后尾静脉采血测定空腹血糖，以空腹血糖≥11.1 mmol/L为DM造模成功。对成功造模的大鼠进行完全随机分组:模型组（M组，Model group）、厄贝沙坦组（I组，Irbesartan group）、通心络组（T组，Tonxinluo group）、津力达组（J组，Jinlida group）和通心络超微粉加滓力达组(TCJ组，Tonxinluo combined Jinlida group)各14只。所有药品溶于5‰的CMC溶液中保持颗粒混悬均匀，M组给予CMC10ml/kg/d，I组给予厄贝沙坦25mg/kg/d，T组给予通心络超微粉0.8g/kg/d，J组给予滓力达颗粒1.5g/kg/d，TCJ组给予（通心络超微粉0.8g+津力达颗粒1.5g）/kg/d，给药干预共12周。于第12周末，收集大鼠尿液测尿微量白蛋白;禁食12h后，10％水合氯醛麻醉，腹主动脉取血，离心留取血清，用于测定各项生化指标;取左肾称重后，分别保存于4％甲醛，用于免疫组化指标的检测;右肾保存于液氮中，观察TGF-β1/Smad信号通路中smad2/3与smad7等蛋白的表达情况。
　　结果:
　　1、一般情况:造模组大鼠较正常组大鼠表现出明显的多饮、多食、多尿及形体消瘦。
　　2、TGF-β1的蛋白表达情况:与N组相比，M组中TGF-β1的表达范围有所扩大，部分扩张的肾小管上皮细胞着色加深;各给药组中TGF-β1的表达与M组均有不同程度的减弱，其中TCJ组更接近于N组中的表达水平。
　　3、FN与CTGF的蛋白表达情况:M组中FN与CTGF的表达范围有所扩大，特异性染色也明显增强，各给药组中FN与CTGF的表达较M组均有不同程度的减弱，其中TCJ组更接近于N组中的表达水平。
　　4、Western Blot检测结果
　　与N组相比较，Smad2/3及p-Smad2/3在M组的表达明显增多(P＜0.01)，TCJ组Smad2/3的表达与N组无明显差异(P≥0.05); Smad7蛋白的表达水平M组、I组、T组、J组、TCJ组显著降低(分别P＜0.05，P＜0.01);说明M组TGF-β1/Smad信号转导通路被激活。与M组相比，Smad2/3蛋白的表达水平I组、TCJ组有降低趋势，但无统计学意义(P＞0.05);而Smad2/3蛋白磷酸化水平显著降低(P＜0.05)，其他组无显著性差异;Smad7蛋白的表达水平I组、TCJ组显著升高(P＜0.01);说明I组、TJ组TGF-β1/Smad信号转导通路激活抑制， TCJ组优于I组，通心络与津力达联用能有效调控TGF-β1/Smad信号转导通路。
　　结论:
　　1、通心络超微粉联合津力达颗粒治疗DM大鼠，可降低Smad2/3的水平，从而抑制TGF-β1/Smad信号转导通路的活化，这可能是其治疗DN的机制之一。
　　2、通心络超微粉联合津力达颗粒治疗DM大鼠，能够降低DM大鼠肾脏组中的FN、CTGF的水平，减少细胞外基质，减轻肾脏纤维化，从而发挥对肾脏的保护作用。

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结论

参考文献

综述 糖尿病肾病发病机制的研究进展

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