慢性乙型病毒性肝炎患者血清IL-27水平及其临床意义

摘要

目的:检测HBV感染患者不同病程阶段(包括慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)及慢加急性肝衰竭(ACLF))血清IL-27变化，分析其血清IL-27变化与IFN-γ、肝功能检测指标及HBV免疫学指标等之间的关系，从而探讨IL-27在CHB病情进展中的作用，为IL-27应用于临床CHB病情监测及指导用药提供科学依据。
　　方法:
　　1、研究对象:CHB患者89例，其中轻度组(light chronic hepatitis B，CHB-1)31例，中度组（moderate chronic hepatitis B，CHB-m）51例，重度组（severe chronic hepatitis B，CHB-s）7例;HBV感染相关肝硬化(livercirrhosis，LC)患者41例（代偿期（compensatory liver cirrhosis，LC-c）患者12例，失代偿期(decompensatory liver cirrhosis，LC-d)患者29例）;HBV感染相关慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure，ACLF)患者36例;健康体检者10例作为对照组。
　　2、生化专用试管取清晨空腹静脉5ml，离心、收集血清后置于-80℃，其余血样送检验科进行肝功能及免疫学检查，主要检测ALT、TBIL、ALB等肝功能指标及HBV相关病毒指标。同时采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法，严格按试剂盒说明书要应用Real-time PCR检测血清中HBV-DNA水平。同时凝血功能专用试管另取5ml外周血进行凝血酶原活动度(prothrombin time activity, PTA)检测，以上均由专职检验人员操作。
　　3、采用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测，参照人IL-27、IFN-γ检测试剂盒说明书，每孔加入50μl标准品或待测样品，在450nm波长处测定各孔的光密度值（OD值），并根据标准孔数值绘制标准曲线，计算待检样品中IL-27、IFN-γ的含量。
　　4、常规病理检测患者肝脏纤维化及炎症反应程度:本组中有57例CHB患者进行肝脏穿刺组织病理活检，方法按照临床常规流程进行。
　　5、对血清IL-27含量与IFN-γ含量及各类患者外周血血清中肝功能检测指标的相关性进行分析。同时分析不同血清ALT含量、不同HBV-DNA复制程度、不同肝脏炎症及纤维化程度患者外周血清中IL-27含量差异及其意义。
　　结果:
　　1、各组患者外周血血清中肝功能指标、IL-27、IFN-γ水平比较
　　不同程度CHB、LC及ACLF患者血清中ALT、AST、TBIL、IL-27、IFN-γ的水平均显著高于对照组(P＜0.01)，PTA则明显低于对照组(P＜0.05)。
　　2、各组患者血清IL-27含量与血清中IFN-γ含量及肝功能各指标相关性分析
　　CHB、LC及ACLF患者血清中IL-27含量分别与IFN-γ、肝功能指标(ALT、TBIL、ALB)及PTA的表达水平呈明显相关性(P＜0.05)，且IL-27含量与ALT、TBIL及IFN-γ含量明显呈正相关(P＜0.05)，而与PTA及ALB含量则明显呈负相关(P＜0.05)。
　　3、血清IL-27与肝组织炎症分级的关系
　　57例行肝穿刺活检术慢乙肝患者，血清IL-27较健康对照组患者明显增高(P＜0.05)，IL-27值并未随着肝脏炎症等级升高而升高，各组之间差别无统计学意义(P＞0.05)。
　　4、血清IL-27与肝组织纤维化的关系
　　行肝穿刺活检术患者中有56例肝脏出现不同程度的纤维化，患者血清IL-27均较健康对照组患者明显增高(P＜0.05)，但各组血清IL-27水平与肝脏纤维化分级无关(P＞0.05)。
　　5、血清IL-27与ACLF患者预后的关系
　　本组36例ACLF患者中，存活11例，死亡25例。存活组患者血清IL-27均值低于死亡组，但差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　6、血清IL-27与MELD评分的关系
　　将LC-c、LC-d及ACLF患者进行MELD评分，分析血清IL-27与MELD评分的关系。结果显示，MELD＞40组与MELD≤40组比较，IL-27含量明显增高，组间差别有统计学意义(P＜0.05)。
　　7、血清IL-27与HBeAg的关系
　　本组患者中，HBeAg(+)90例，HBeAg(-)86例。统计学分析结果显示，HBeAg阳性组与阴性组比较，血清IL-27水平差别无统计学意义(P＞0.05)。
　　8、血清IL-27与HBV复制的关系
　　根据HBV载量不同分为HBV-DNA＜5log10 copies/ml60例，5≤HBV-DNA≤7log10copies/ml69例，HBV-DNA＞7log10copies/ml47例。方差分析结果显示，三组之间两两比较血清IL-27水平差别无统计学意义（P＞0.05）。
　　结论:
　　1、IL-27可促进Th1型细胞免疫应答，增加IFN-γ的表达，同时可能是HBV感染患者肝细胞受损的重要机制之一，在一定程度上反映肝细胞损伤的严重程度，但是IL-27本身可能对HBV复制无明显作用。
　　2、IL-27可能与慢性乙肝重症化相关，是预测其预后的参考指标之一。

目录

声明

摘要

英文缩写

前言

材料与方法

1 主要仪器、设备

2 主要试剂

3 方法

结果

1 所有研究对象的临床特征

2 不同临床分型患者血清IL-27、IFN-γ水平

3 血清IL-27与肝细胞损伤及炎症反应的关系

4 血清IL-27与肝组织纤维化的关系

5 血清IL-27与慢性乙肝重症化的关系

6 血清IL-27与HBeAg的关系

7 血清IL-27与HBV复制的关系

附表

讨论

结论

参考文献

综述

致谢

个人简历