特异性免疫治疗对尘螨所致变应性鼻炎患者IL-17,IL-35表达水平及Treg/Th17细胞平衡的影响

摘要

目的：近年研究发现调节性T细胞（Treg）、辅助性T细胞17(Th17)及相关细胞因子IL-17与AR的发生密切相关，Treg/Th17细胞失衡学说日益受到重视，我们拟通过本实验研究尘螨阳性变应性鼻炎患者舌下特异性免疫治疗前后外周血中IL-17，IL-35表达水平及Treg细胞百分率、Th17细胞百分率的变化，同时对治疗前IL-17与IL-35、Th17细胞的相关性进行了分析,以探讨舌下免疫治疗对L-17，IL-35表达水平及Treg/Th17细胞平衡的影响。
　　方法：随机选取2014年12月至2015年12月就诊于河北医科大学第二医院耳鼻喉科、符合本实验纳入条件并接受舌下特异性免疫治疗的变应性鼻炎患者（AR）30例为治疗组，给予舌下含服“粉尘螨滴剂”联合对症药物进行治疗。经过舌下特异性免疫治疗1年后的同患者为治疗后组。同时随机选取我院体检部健康且自愿加入本研究者30例为正常对照组。采集外周静脉血4.5 ml，离心，取上层血清，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法，检测正常组及 AR组治疗前后血清中的 IL-35和IL-17，根据实验所测OD值，计算浓度值。同时，采集外周血2.5 ml，采用流式细胞术，检测正常组及 AR组治疗前后外周血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞及 CD4+IL-17+Th17细胞，结果以CD4+CD25+Foxp3+T细胞、CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞的百分率表示。所有本实验数据都采用SPSS19.0软件处理，本实验所有数据都是计量资料，且符合正态分布，用药前后比较，采用配对T检验，相关性分析采用Pearson相关检验，所有统计均采用双侧概率检验，α=0.05，以P＜0.05为差异有统计学意义。
　　结果：⑴尘螨阳性变应性鼻炎患者治疗前血清中IL-17的表达水平较正常对照组（21.559±9.548）pg/mL升高，血清中IL-35的表达水平较正常对照组（29.425±5.378）pg/mL降低，CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率较正常对照组（0.543±0.178）％降低、CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞的百分率较正常对照组（0.359±0.143）%升高，且差异均有统计学差异。⑵变应性鼻炎患者在舌下特异性免疫治疗前，血清中IL-17与IL-35表达水平没有明显的相关性（r=-0.143，P>0.01）；IL-17的表达水平与CD4+IL-17+Th17细胞的百分率呈正相关（r=0.888，P<0.01）。⑶变应性鼻炎组免疫治疗前后血清中IL-35的表达水平分别为：（17.672±7.458） pg/mL和（25.133±9.122）pg/mL，（t=-4.083，P＜0.05）,治疗后较治疗前表达水平上升，差异有统计学意义。⑷变应性鼻炎组治疗前后血清中IL-17的表达水平分别为：（35.552±8.328） pg/mL和（24.070±8.409）pg/mL，（t=5.030，P＜0.05）,治疗后较治疗前下降，差异有统计学意义。⑸变应性鼻炎组治疗前后外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率分别为（0.147±0.069）%和（0.404±0.200）%，（t=-10.584，P＜0.05），治疗后较治疗前上升，且差异有统计学意义。⑹治疗前后外周血中CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞的百分率分别为（1.155±0.258）%和（0.721±0.276）%，（t=6.258，P＜0.05），治疗后较治疗前下降，且差异有统计学意义。⑺正常对照组与变应性鼻炎患者治疗后外周血中IL-17、IL-35的表达水平，CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞、CD4+IL-17+Th17细胞所占CD4+T细胞的百分率均有统计学差异。
　　结论：特异性免疫治疗能够对变应性鼻炎患者外周血中IL-17、IL-35的表达水平及Treg/Th17细胞平衡产生影响。

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前言

材料与方法

1 实验材料

1.1 研究对象

1.2 主要试剂

1.3 主要仪器

2 实验方法

2.1 实验标本的收集保存

2.2 ELISA实验过程

2.3流式细胞术实验过程一：Treg细胞检测

3 统计学处理

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述: 变应性鼻炎舌下特异性免疫治疗研究进展

致谢

个人简历