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肿瘤转移相关基因MTA2在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞生物学特性的研究

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前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学处理

结果

1 膀胱癌组织中MTA2的表达水平

2膀胱癌细胞系中MTA2的表达水平

3 膀胱癌细胞中转染MTA2基因

4 过表达和敲低 MTA2 基因分别对膀胱癌细胞在体外增殖活性的影响

5 转染MTA2基因对膀胱癌细胞在体外克隆形成能力的影响

6 转染MTA2基因对膀胱癌细胞在体外迁移能力的影响

7 转染MTA2基因对膀胱癌细胞在体外侵袭能力的影响

8 转染MTA2基因对膀胱癌细胞在体外划痕愈合能力的影响

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述: 肿瘤转移相关基因MTA2在肿瘤中的研究进展

致谢

个人简历

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摘要

目的:研究肿瘤转移相关基因 MTA2在膀胱癌中的表达水平及其与临床病理特征的相关性,并探讨 MTA2对人膀胱癌细胞生物学特性的影响。
  方法:
  1、应用免疫组化方法检测膀胱癌组织、非癌组织中 MTA2的表达,并分析MTA2与膀胱癌患者临床病理特征的相关性。
  2、应用Western blotting方法检测人膀胱癌细胞T24、EJ、J82三种细胞的MTA2的表达水平。
  3、应用RT-PCR法和Western blotting方法检测过表达MTA2膀胱癌T24细胞和敲低MTA2膀胱癌EJ细胞的MTA2的表达水平。
  4、应用MTS法、克隆形成实验、划痕法、Transwell迁移和Matrigel侵袭实验检测过表达MTA2对人膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。
  5、应用MTS法、划痕法、Transwell迁移和Matrigel侵袭实验检测敲低MTA2对人膀胱癌EJ细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。
  结果:
  1、免疫组化实验结果显示,与正常非癌膀胱组织相比,膀胱癌组织中MTA2表达水平明显上调(P<0.01);膀胱癌组织中 MTA2的表达水平与肿瘤患者的性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05),而与肿瘤的组织学分级、临床分期、淋巴浸润和转移相关(P<0.05)。
  2、 Western blotting方法结果显示,人膀胱癌T24细胞中MTA2的蛋白表达水平明显低于人膀胱癌EJ细胞和J82细胞中的表达(P<0.05);而人膀胱癌 EJ细胞中 MTA2的蛋白表达水平明显高于其他两种肿瘤细胞(P<0.05)。
  3、RT-PCR法和Western blotting方法结果显示,过表达MTA2的膀胱癌T24细胞中MTA2的蛋白表达水平明显高于转染CD511B空载体的膀胱癌T24细胞与未做处理的膀胱癌T24细胞(P<0.05);敲低MTA2的膀胱癌EJ细胞中MTA2的蛋白表达水平明显低于转染si-NC的对照组与未做处理的EJ细胞(P<0.05)。
  4、 MTS法结果显示,过表达MTA2对人膀胱癌T24细胞的增殖性明显升高(P<0.05);敲低 MTA2对人膀胱癌 EJ细胞的增殖性明显降低(P<0.05)。
  5、克隆形成实验结果显示,过表达MTA2能促进人膀胱癌T24细胞的克隆形成能力(P<0.01)。
  6、 Transwell迁移结果显示,过表达MTA2能够促进膀胱癌T24细胞的细胞迁移能力(P<0.01);敲低MTA2能够抑制膀胱癌EJ细胞的迁移能力(P<0.01);Matrigel侵袭实验结果显示,过表达MTA2能够促进膀胱癌T24细胞的细胞侵袭能力(P<0.01);敲低MTA2能够抑制膀胱癌EJ细胞的侵袭能力(P<0.01)。
  7、划痕实验结果显示,过表达MTA2能够促进膀胱癌T24细胞的划痕愈合能力(P<0.01);敲低MTA2能够抑制膀胱癌EJ细胞的划痕愈合能力(P<0.01)。
  结论:
  MTA2在膀胱癌组织中表达上调。膀胱癌组织中 MTA2的表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤大小无关,而与肿瘤的临床分期、组织学分级和淋巴转移相关。MTA2能够促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。

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