双红秦榆汤对溃疡性结肠炎大鼠IL-23和MUC2的影响

摘要

目的：本研究通过观察双红秦榆汤对溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis， UC）大鼠一般情况、疾病活动指数（DAI）、结肠黏膜病理的影响，并检测大鼠血清白介素-23（IL-23）含量及结肠组织中黏蛋白2(MUC2)表达水平，探讨双红秦榆汤治疗溃疡性结肠炎的可能的作用机制。
　　方法：60只健康清洁级雄性Wistar大鼠（体重250-300g）适应性喂养1周后，随机分为空白对照组（Control Check，CK）、模型组（Model Group，MG）、美沙拉嗪组（Mesalamine Group，MSG）、双红秦榆汤高剂量组（High-doze Group，HDG）、中剂量组（Moderate-doze Group，MDG）、低剂量组（Low-doze Group，LDG）6组，每组10只。除空白对照组外，其余各组予2,4,6，-三硝基苯磺酸（2,4,6-trini-trobenzene esulfonic acid， TNBS）/乙醇联合法建立UC大鼠模型。造模后第4天，CK及MG继续常规喂养，MSG组大鼠予美沙拉嗪混悬液灌胃，HDG、MDG、LDG组分别予高、中、低浓度的双红秦榆汤灌胃。连续灌胃治疗2周，期间观察、记录各组大鼠的饮食、体重、粪便次数及性状、活动情况及精神状态等变化，并计算DAI评分。结束治疗后，各组大鼠禁食不禁水24h，采用10％水合氯醛腹腔注射麻醉后，留取腹主动脉血液标本，采用双抗体夹心酶联检测法（ELISA法）测定大鼠血清IL-23含量。剖腹取病变较为明显的结肠组织，肉眼及镜下观察其病理变化，并用免疫组化测定黏膜 MUC2表达情况。
　　结果：
　　1、一般情况观察及DAI评分
　　一般情况：CK组大鼠精神佳，被毛光滑有色泽，食欲旺盛，活动灵活，大便正常。其余各组造模后大鼠出现精神不振，反应迟钝，食欲下降，大便稀溏、带有黏液及脓血，喜弓背，喜扎堆，被毛杂乱无光泽。MG组大鼠情况随着实验的进行逐渐加重，其余4组经药物治疗后，大鼠的精神状态、饮食情况、大便性状等一般情况逐渐好转，其中HDG组大鼠改善最为明显，接近CK组，MSG、MDG组大鼠情况改善相近，无明显差别，情况较LDG组要好；
　　DAI评分：CK组为（0.000±0.000），低于其他五组，差异有统计学意义（P<0.05）；HDG组（0.406±0.282）、MDG组（0.901±0.357）、MSG组（0.899±0.298）、LDG组（1.332±0.267）均低于MG组（2.485±0.243），差异有统计学意义（P<0.05）；HDG组（0.406±0.282）低于MDG组（0.901±0.357）、MSG组（0.899±0.298）、LDG组（1.332±0.267），差异有统计学意义（P<0.05）；LDG组（1.332±0.267）高于MDG组（0.901±0.357）、MSG组（0.899±0.298），差异有统计学意义（P<0.05）；MSG组（0.899±0.298）与MDG组（0.901±0.357）相比，差异无统计学意义（P>0.05）。
　　2、结肠黏膜组织病理学观察
　　肉眼观察：MG组情况最差，黏膜损伤最严重；CK组黏膜正常；各治疗组中HDG组最好，接近CK组；MSG组与MDG组情况好于LDG组；LDG组比MG组稍好；
　　镜下观察：CK组肠黏膜上皮光滑，腺体排列整齐，结构清晰，为正常黏膜组织；MG组肠黏膜有明显充血水肿、糜烂，多处溃疡面，黏膜破坏明显；HDG组肠黏膜基本完整，与CK组相近；MDG组与MSG组黏膜改变相近，次于HDG组，好于LDG组；LDG组黏膜病理改变好于MG组。
　　3、 IL-23及MUC2含量情况
　　IL-23含量比较：MG组(31.30±1.65）、HDG组（22.46±0.60）、MSG组（24.85±1.17）、MDG组（25.42±1.18）、LDG组（27.82±0.81）均高于CK组（21.07±0.87），差异有统计学意义（P<0.05）；各治疗组均低于MG组（31.30±1.65），差异有统计学意义（P<0.05）；HDG组（22.46±0.60）低于MSG组（24.85±1.17）、MDG组（25.42±1.18）、LDG组（27.82±0.81），差异具有统计学意义（P<0.05）；LDG组（27.82±0.81）高于MSG组（24.85±1.17）、MDG组（25.42±1.18），差异有统计学意义（P<0.05）；MSG组（24.85±1.17）与MDG组（25.42±1.18）相比，差异无统计学意义（P>0.05）；
　　MUC2含量比较：MG组(0.062±0.006）、HDG组（0.298±0.040）、MSG组（0.146±0.055）、MDG组（0.129±0.034）、LDG组（0.096±0.029）均低于CK组（0.415±0.032），差异有统计学意义（P<0.05）；各治疗组均高于MG组（0.062±0.006），差异有统计学意义（P<0.05）；HDG组（0.298±0.040）高于MSG组（0.146±0.055）、MDG组（0.129±0.034）、LDG组（0.096±0.029），差异有统计学意义（P<0.05）；LDG组（0.096±0.029）低于MSG组（0.146±0.055）、MDG组（0.129±0.034），差异有统计学意义（P<0.05）；MSG组（0.146±0.055）与MDG组（0.129±0.034）相比，差异无统计学意义（P>0.05）。
　　结论：
　　1、双红秦榆汤可有效改善UC大鼠的一般情况、降低DAI评分，减轻结肠黏膜炎症损伤，并且其效果与药物计量存在量-效关系，高剂量组效果最为明显。
　　2、双红秦榆汤治疗UC的机制可能是通过下调血清IL-23水平、上调结肠黏膜MUC2的表达调节肠道免疫反应、修复受损的肠黏膜来实现的。

目录

声明

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计方法

结果

1 大鼠一般情况与DAI评分

2 结肠黏膜肉眼及镜下观察

3 血清IL-23水平及结肠黏膜MUC2蛋白表达情况

附图

附表

讨论

1 现代医学对UC的认识

2 祖国医学对UC的认识

3 双红秦榆汤的组方机理

4 双红秦榆汤具体药物分析及现代药理研究

5 双红秦榆汤治疗UC的机制探讨

6 典型病例

7 问题与展望

结论

参考文献

综述:溃疡性结肠炎的中医治疗研究进展及优势

致谢

个人简历