上皮性卵巢癌患者程序性死亡受体1(PD-1)及其配体表达的临床意义研究

摘要

第一部分：上皮性卵巢癌患者外周血及腹水淋巴细胞中PD-1表达情况的研究
　　目的：程序性死亡受体1（PD-1），是肿瘤微环境中重要的免疫抑制调控分子，在肿瘤免疫逃逸中起到重要作用。肿瘤微环境中除了肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）外，一些学者认为肿瘤相关淋巴细胞（TALs），如腹水淋巴细胞（ascites lymphocytes, AL）、外周血淋巴细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMC）在肿瘤免疫逃逸中也应具有重要作用，并逐渐成为学者的研究热点。本研究拟探讨上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer，EOC）患者和良性卵巢肿瘤患者AL以及PBMC中PD-1的表达差异，并分析卵巢癌患者AL以及PBMC中PD-1与不同临床病理特征之间的关系。结果为探讨 PD-1的表达是否能作为 EOC诊断和预后的肿瘤分子标记物提供重要的临床数据。
　　方法：
　　1.收集50例上皮性卵巢癌患者和20例良性卵巢肿瘤患者的腹水及外周血标本。采用密度梯度离心法分离提取AL及PBMC。应用流式细胞学法测定AL和PBMC中PD-1的表达情况，并应用cell Quest Pro软件进行图像显示与分析。
　　2.分析评价上皮性卵巢癌及良性卵巢肿瘤患者AL与PBMC中PD-1的表达情况，并对其在不同临床病理参数之间的差异进行分析，应用SPSS21.0统计软件，以P<0.05作为差异显著性标准。
　　结果：
　　1.上皮性卵巢癌患者AL中PD-1+、CD8+PD-1+、CD4+PD-1+的表达明显高于良性卵巢肿瘤患者（P=0.000）。但上皮性卵巢癌与良性卵巢肿瘤患者相比PBMC中PD-1+、CD8+PD-1+、CD4+PD-1+的表达情况却未见明显差异（P＞0.05）。
　　2.上皮性卵巢癌患者AL中PD-1的表达明显高于PBMC中PD-1的表达（P=0.000）。且早期（Ⅰ-Ⅱ期）患者(FIGO分期)AL中PD-1的表达水平明显低于与晚期（Ⅲ-Ⅳ期）患者（P=0.004），其余临床病理参数（年龄、分化程度、病理类型、血清CA125水平）之间PD-1的表达水平未见明显差异（P＞0.05）。
　　3.血清CA125≤800 U/ml的上皮性卵巢癌患者，其PBMC中PD-1的表达水平高于血清 CA125＞800 U/ml的患者（P=0.048），其余临床病理参数（年龄、分化程度、病理类型、FIGO分期）之间的PD-1表达水平未见明显的统计学差异（P＞0.05）。
　　4.根据上皮性卵巢癌患者1年随访结果，1年内死亡和生存的患者AL和PBMC中PD-1的表达结果均未见明显的统计学差异（P＞0.05）。1年内疾病复发和疾病无进展的患者AL和PBMC中PD-1的表达水平也未观察到明显统计学差异（P＞0.05）。
　　第二部分：上皮性卵巢癌患者癌组织中PD-L1和PD-L2表达情况的研究
　　目的：PD-L1和 PD-L2为程序性死亡受体1（PD-1）的两个配体， PD-1与其配体结合后参与抑制性免疫调控，抑制T细胞特异性杀伤能力，使肿瘤细胞发生免疫逃逸导致疾病进展，从而介导肿瘤的免疫逃逸。本研究拟探讨上皮性卵巢癌组织与正常或良性卵巢组织PD-L1和PD-L2中的表达差异，并分析卵巢癌组织中PD-L1和PD-L2的表达情况与其不同临床病理特征之间的关系，目的在于明确上皮性卵巢癌中 PD-L1和 PD-L2表达的临床意义，为临床诊断及个体化肿瘤免疫治疗提供新思路。
　　方法：
　　1.选取82例经病理学证实为上皮性卵巢癌的癌组织及15例良性或正常的卵巢组织，采用免疫组织化学方法进行染色，并由两位病理科专业医师进行阅片，最终确定卵巢组织中PD-L1和PD-L2的表达情况，采用二次计分法对数据进行分析。
　　2.分析评价上皮性卵巢癌及良性或正常卵巢组织中 PD-L1和 PD-L2的表达特征，并分别对PD-L1和PD-L2在不同临床病理参数之间的差异进行分析，应用SPSS21.0统计软件，以P<0.05作为差异显著性标准。
　　结果：
　　1.上皮性卵巢癌组织中PD-L1和PD-L2的表达水平明显高于良性或正常卵巢组织（P=0.018、0.031）。
　　2.在浆液性癌组织中 PD-L1的表达明显高于非浆液性癌组织（P=0.011）。血清CA125≤800 U/ml水平患者癌组织中PD-L1的表达低于CA125＞800 U/ml患者（P=0.020）。但在上皮性卵巢癌组织中PD-L1的表达在不同年龄、FIGO分期、分化程度中表达却无明显差异（P＞0.05）， PD-L2的表达情况在各个临床病理参数之间相比也均无差异（P＞0.05）。
　　3.根据上皮性卵巢癌患者1年随访结果，1年内死亡和生存的患者癌组织中PD-L1和PD-L2的表达结果均未见明显的统计学差异（P＞0.05）。1年内疾病复发和疾病无进展的患者癌组织中PD-L1和PD-L2的表达水平也未观察到明显的统计学差异（P＞0.05）。
　　结论：上皮性卵巢癌患者腹水淋巴细胞中PD-1表达水平明显高于良性卵巢肿瘤患者；癌组织中PD-L1和PD-L2的表达情况明显高于良性或正常卵巢组织；且均与特定的临床病理特征明显相关，表明PD-1及其配体可能成为上皮性卵巢癌的肿瘤分子标志物，为临床诊断及个体化肿瘤免疫治疗提供新思路。

目录

声明

英文缩写

引言

第一部分上皮性卵巢癌患者外周血及腹水淋巴细胞中PD-1表达情况的研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分上皮性卵巢癌患者癌组织中PD-L1和PD-L2表达情况的研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

结论

综述:PD-1及其配体在妇科肿瘤中的研究现状及进展

致谢

个人简历