热损伤对4-硝基喹啉-1-氧化物诱导食管鳞状细胞癌发生过程的影响

摘要

目的：
　　研究通过使用灌胃针灌胃C57/BL6小鼠热蒸馏水，来诱导小鼠食管热损伤时，所需的适宜进针深度；75℃无菌蒸馏水对C57BL/6小鼠食管的热损伤及修复情况；75℃无菌蒸馏水长期多频次刺激C57BL/6小鼠食管，能否加速4NQO诱导小鼠食管癌变的过程。
　　方法：
　　1.通过测量不同体重区间的6周龄雌性C57/BL6小鼠的体长，下门齿上缘至主动脉弓下缘的距离，下门齿至膈肌平面的距离，来获得特定条件下的食管长度参数，为选取适宜的灌胃针进针深度提供参数。
　　2.75℃灭菌热蒸馏水0.2ml灌胃小鼠1次后，于第12小时，48小时，72小时，3个时间点，将小鼠行安乐死，取主动脉弓以下食管行组织病理学观察。
　　3.采用75℃灭菌热蒸馏水0.2ml，每48小时1次灌胃，作为热损伤组；以100μg/mL的4NQO水溶液令小鼠自由饮用，作为诱癌剂组；以自由饮用100μg/mL的4NQO水溶液联合75℃灭菌热蒸馏水0.2ml灌胃，48小时灌胃1次，作为热损伤联合诱癌组；每48小时灌胃0.2ml常温蒸馏水1次，作为对照组；于实验的8,12,16,19周，安乐死前3组小鼠各3只，取食管行组织病理学观察。21周时安乐死4组所有小鼠，取食管行组织病理学观察。
　　结果：
　　1.小鼠的体重与体长，门齿距主动脉弓下缘距离，门齿距膈肌平面的距离，这3者之间没有明显的相关性，门齿距离膈肌平面的距离的（-X±S）为：28.3±1.41（mm）。
　　2.C57BL/6小鼠可以耐受75℃热蒸馏水灌胃的单次热损伤，损伤多局限于粘膜层，基底细胞受损少见，热损伤后12小时病理表现为:Ⅰ度烧伤的表现。48小时候后热损伤食管粘膜层已经表现出修复倾向，但仍有明显细胞水肿及炎性细胞浸润，且其炎症反应较12小时时更加严重。72小时后食管粘膜基本修复完好，但食管全层仍有少量淋巴细胞浸润，其他未见明显异常。
　　3.诱癌剂组小鼠16周见食管粘膜呈Ⅲ度不典型增生表现，19周可见原位癌，21周小鼠癌变率为100％，其中5只癌细胞浸润至肌层占33.3％，10只癌细胞浸润至粘膜下层占66.7％；热损伤联合诱癌剂组小鼠，12周既可见Ⅲ度不典型增生，16周见早期癌变，19周和21周均可见食管癌变呈浸润性表现，癌变率为100﹪，其中21周时10只浸润至食管肌层占83.3％，2只浸润至粘膜下层占16.7％；行卡方检验来验证21周时诱癌剂组与热损伤联合诱癌剂组的癌细胞浸润至食管肌层所占的比率是否有统计学差异，结果示：p=0.019＜0.05，证明21周时，诱癌剂组与热损伤联合诱癌剂组的癌细胞浸润程度是有差距的。热损伤组小鼠从16周起可周见食管粘膜呈单纯增生样改变，但至实验结束，热损伤组小鼠未有癌变发生，21周时可见4只小鼠呈中度单纯性增生表现，14只呈轻度增生样改变。
　　结论：
　　1.门齿距主动脉弓下缘距离的均值约为28mm,是较为适宜的灌胃针进针深度，把灌胃时灌胃针的插入深度定位28mm，可以基本保证，主动脉弓以下食管在每次灌胃时受到热损伤。
　　2.75℃灭菌蒸馏水0.2ml灌胃小鼠可以引起小鼠食管粘膜层急性损伤，48小时后小鼠食管粘膜未能完全修复，细胞水肿及炎性细胞浸润明显，72小时后小鼠食管基本修复正常。
　　3.75℃多次刺激引起的小鼠食管的慢性热损伤，可以加速4NQO的诱癌进程，虽然单纯75℃热损伤至实验结束，未能诱导小鼠食管癌变，但尚不能证明单纯热损伤不会导致癌变发生。

目录

声明

英文缩写

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

3位病理科医师镜下观察。

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:食管热损伤以及亚硝胺类化合物诱导食管癌的研究进展

致谢

个人简历