瑞舒伐他汀治疗大脑中动脉粥样硬化性脑梗死的高分辨率磁共振成像(HR-MRI)观察及机制研究

摘要

第一部分瑞舒伐他汀治疗大脑中动脉粥样硬化性脑梗死的高分辨率磁共振成像(HR-MRI)观察
　　目的：
　　脑梗死是神经内科的常见病、多发病，其致残率高，社会负担重。目前，脑梗死的治疗手段是非常有限的。降脂固斑是动脉粥样硬化脑梗死的重要治疗和预防手段，他汀类药物是其主要的治疗药物之一，但对脑动脉粥样硬化治疗的评价手段目前还有待进一步研究。本课题旨在研究症状性大脑中动脉（middle cerebral artery,MCA）狭窄的缺血性卒中患者，给予瑞舒伐他汀（10mg/d）6个月治疗后，采用高分辨率磁共振成像(high resolution magnetic resonance imaging,HR-MRI)评估大脑中动脉动脉粥样硬化斑块的变化及对血脂的影响，以期观察药物治疗之后斑块的大小、形状、成分等的改变。
　　方法：
　　新发的缺血性脑卒中患者经磁共振血管成像（magnetic resonance angiography,MRA）及经颅多普勒超声（transcranialdoppler ultrasound,TCD）证实存在大脑中动脉M1段狭窄，低密度脂蛋白(LDL-C)水平≥70mg/dl（1.8mmol/L）、但≤250mg/dl（6.5mmol/L）。病人行HR-MRI检查，了解患者大脑中动脉狭窄程度及斑块形态及大小，之后长期给予瑞舒伐他汀10mg/d治疗6个月，再次复查HR-MRI了解患者斑块变化情况及血脂变化。
　　结果：
　　患者服用瑞舒伐他汀6月后，行HR-MRI检查，其中2名患者MRA显示一侧MCA闭塞，HR-MRI影像示管腔被斑块堵塞，增强后可见明显强化；2名患者，MRA影像上变化不明显，但经HR-MRI检查后发现斑块较前加重，增强后可见明显强化；还有3名患者服药时间未到，未复查HR-MRI，但未服用瑞舒伐他汀时的MRA示MCA局限性狭窄，HR-MRI可见管腔内斑块存在，增强后可见明显强化；7名患者的血脂有下降趋势，但结果无统计学差异。
　　第二部分瑞舒伐他汀对过氧化氢导致的血管内皮损伤的保护作用及其机制研究
　　目的：
　　脑梗死是神经内科的常见病和多发病，严重威胁着人类的身体健康，脑梗死最常见的病因是动脉粥样硬化，而动脉粥样硬化与血管内皮的损伤密切相关，瑞舒伐他汀钙（rosuvastatin calcium,RS）作为脑梗死的一级及二级预防的药物，有降脂、抗炎、抗氧化、改善内皮功能等多重作用。我们前期研究发现脑梗死后线粒体钙离子单向转运体（mitochondrial calciumuniport,MCU）激活，导致线粒体钙离子超载，加重脑梗死神经元损伤。本实验旨在探讨瑞舒伐他汀能否减轻过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）导致的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）损伤？其机制是否通过抑制MCU从而抑制钙超载而发挥内皮细胞保护作用？
　　方法：
　　建立H2O2损伤人脐静脉内皮细胞（HUVEC）模型，将常规培养的HUVEC同步化24h，分为对照组，H2O2模型组，不同浓度瑞舒伐他汀（RS）（0.5μmol/L、1μmol/L、5μmol/L）提前干预2h+H2O2组，通过噻唑蓝（3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl）-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT）了解瑞舒伐他汀对H2O2诱导HUVEC损伤后细胞活力的影响，并通过实时定量荧光聚合酶链反应（real-time reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）了解各组MCU mRNA表达情况。
　　结果：
　　1.不同浓度瑞舒伐他汀（0.5μmol/L、1μmol/L、5μmol/L）处理HUVEC24h，HUVEC细胞活力与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。
　　2.H2O2诱导HUVEC损伤模型制备，随着H2O2浓度增高，细胞活力明显降低，在750μmol/L浓度时与对照组相比细胞活力下降约50％，故将750μmol/L浓度作为损伤模型浓度（P<0.05）。
　　3.不同浓度瑞舒伐他汀（0.5μmol/L、1μmol/L、5μmol/L）提前干预HUVEC2小时再与750μmol/L H2O2共处理24小时，随着瑞舒伐他汀浓度的增高，HUVEC细胞活力与模型组相比明显升高（P<0.05）。
　　4.RT-qPCR显示MCU mRNA在H2O2模型组、瑞舒伐他汀0.5μmol/L提前干预2h+H2O2组的表达较对照组明显增高（P<0.05），瑞舒伐他汀1μmol/L、5μmol/L提前干预2h+H2O2组与模型组相比其表达下降，在瑞舒伐他汀5μmol/L组下降最显著（P<0.05）。
　　结论：
　　1.通过本研究建立了HR-MRI观察颅内动脉狭窄血管斑块的方法，但在这项研究（是北京天坛医院发起的多中心研究）中，由于我们参与病例数较少，有的病人复诊时间未到，有些数据尚未完成统计分析，瑞舒伐他汀降脂、稳定和逆转斑块的作用尚需进一步研究。
　　2.过量的H2O2可以诱导HUVEC损伤，并导致MCU释放；而瑞舒伐他汀可以抑制H2O2诱导的细胞死亡，增加细胞活力，其机制可能是通过抑制MCU从而抑制钙超载而发挥内皮细胞保护作用。

目录

声明

英文缩写

引言

第一部分瑞舒伐他汀治疗大脑中动脉粥样硬化性脑梗死的高分辨率磁共振成像（HR-MRI）观察

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分瑞舒伐他汀对过氧化氢导致的血管内皮损伤的保护作用及机制研究

前言

材料与方法

结果

附图

讨论

小结

参考文献

结论

综述:瑞舒伐他汀对血管的作用

致谢

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