VEGF-A、MCP-1及RANTES在血液透析患者自体动静脉内瘘狭窄部位表达的研究

摘要

目的：
　　自体动静脉内瘘（arteriovenous fistula，AVF）是血液透析患者首选的血管通路。但是AVF失功率较高。近吻合口静脉内膜增生，导致血管狭窄是AVF失功的最主要原因，在组织学上表现为血管平滑肌细胞的迁移和增殖，新生血管形成以及细胞外基质的过度沉积。尽管确切发病机制尚未清楚，但是实验和临床研究发现，多种细胞因子参与这一过程。血管内皮生长因子-A（Vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A）可以促进内皮细胞和平滑肌细胞的增殖、迁移，同时能够促进单核细胞、巨噬细胞聚集。尤其是在血管重塑和再狭窄中发挥重要作用。炎症在AVF狭窄中起到重要作用，而单核细胞趋化蛋白-1（Monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）可以促进单核、巨噬细胞浸润到炎症部位。还能够活化并且促进平滑肌细胞向内膜的迁移与增殖，此外，它还可调节血管生成，并且在血管重塑和炎症性疾病中起到重要作用。受激活调节正常T细胞表达和分泌因子（Regulated upon activation, normal T-cell expressed and secreted，RANTES）作为一种趋化因子可以活化炎症细胞，并趋化炎症细胞向损伤和炎症部位聚集。尤其在促进血管生成中起到非常重要作用。本实验通过检测AVF静脉标本中VEGF-A、MCP-1和RANTES表达水平的变化，探讨VEGF-A、MCP-1以及RANTES与AVF内膜增生的关系。
　　方法：
　　选取28名已行规律血液透析治疗的终末期肾脏病患者，分为实验组和对照组。其中实验组14名为因近吻合口静脉狭窄导致AVF失功来我科行AVF重建术的患者。对照组则为拟初次行AVF成形术的14名患者。
　　实验组患者行AVF重建术时,切取废弃的完整增生肥厚的静脉组织约1cm作为实验组；对照组患者初次行AVF端侧吻合术，将头静脉结扎切断后，于近心端切取0.5-1cm的完整静脉作为对照组。各组标本分别进行HE和免疫组织化学染色，并于光镜下观察。
　　所得实验数据均采用SPSS21.0统计软件进行分析，结果用均数±标准差（-x±s）表示，p＜0.05认为差异具有统计学意义。
　　结果：
　　1.患者临床基本统计学资料
　　对2组患者年龄、性别及肾衰竭原发病构成比进行统计学分析，差异均无统计学意义（p>0.1）。
　　2.HE染色
　　光镜下观察发现实验组失功AVF的静脉内膜明显增厚，并有大量炎细胞浸润和新生血管形成，对照组静脉内膜未见明显增生肥厚，无明显炎细胞浸润及新生血管形成，对实验组和对照组的内膜/中膜厚度比和内膜/中膜面积比进行了比较，差异具有统计学意义（p均<0.001）。
　　3.免疫组织化学染色
　　3.1.VEGF-A免疫组织化学染色VEGF-A表达主要位于胞浆中。在实验组中以强阳性表达为主，主要位于中膜和内膜；而对照组静脉VEGF-A表达呈弱阳性，主要位于内膜和中膜，其中内膜较明显。实验组VEGF-A的表达水平明显高于对照组，差异具有统计学意义(p<0.01)。
　　3.2.MCP-1免疫组织化学染色MCP-1主要表达于胞浆中。实验组以强阳性表达为主，位于静脉内膜和中膜。而对照组MCP-1表达以弱阳性为主，位于静脉内膜和中膜，以中膜更明显。实验组MCP-1的表达水平明显高于对照组，差异具有统计学意义(p<0.01)。
　　3.3.RANTES免疫组化染色RANTES主要表达于胞浆。实验组RANTES表达以强阳性为主，主要在内膜和中膜。对照组RANTES呈弱阳性表达，位于内膜和中膜。实验组RANTES的表达水平明显高于对照组，差异具有统计学意义(p<0.01)。
　　3.4.免疫组织化学染色的阴性对照：阴性对照组内膜和中膜均未见阳性染色，血管外膜呈棕黄色，但是未见阳性细胞，考虑为非特异性染色。
　　结论：
　　1.VEGF-A、MCP-1及RANTES的高表达与静脉内膜增生密切相关，可能成为未来干预的靶点。
　　2.VEGF-A可能通过介导MCP-1的表达，继而介导RANTES的表达，在AVF内膜增生中发挥作用。
　　3.VEGF-A也可能直接介导MCP-1和RANTES的表达，在AVF内膜增生中发挥作用。

目录

声明

英文缩写

前言

材料与方法

1材料

2方法

结果

1 患者基本统计学资料

2 HE染色

3免疫组化染色

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:动静脉内瘘I型狭窄发病机制及预防措施

致谢

个人简历