加味白头翁汤对肉仔鸡大肠杆菌病的防治效果研究

摘要

肉鸡大肠杆菌病是临床上常见的禽病之一，具有发病快、死亡率高的特点，给肉鸡养殖业造成了极大的危害。随着肉鸡养殖业的迅速发展和集约化程度的提高，肉仔鸡大肠杆菌流行势头愈加猛烈，给肉鸡生产造成了严重损失。长期以来，对于大肠杆菌病多采用抗生素等药物进行防治，由于抗生素等化学药物的不合理应用，导致大肠杆菌的耐药谱不断扩大，且易在禽体内形成残留，严重影响了人类健康和公共卫生安全。中草药及中药组方制剂对禽大肠杆菌病有较好的防治效果，并具有残留低、治愈率高、不易产生耐药性等特点，符合当今社会倡导的绿色养殖的行业要求，有着广阔的应用前景。虽然中药防治肉鸡大肠杆菌病的研究很多，但还存在着许多制约其推广应用的难点。本研究目的是筛选出防治鸡大肠杆菌病的最佳中药组方，并对其临床疗效及其机理作初步的探讨，为其进一步应用于生产实践提供理论依据。
　　1.中药组方筛选
　　根据中兽医整体观念和辨证论治理论自拟中药处方3个，分别为方一、方二、方三，另从药典查方一个，即方四。
　　各组方分别用10倍的水浸泡20min，煎煮20min，倒出药液，加水再煎20min，2次药液合并、浓缩、离心后定容至生药浓度为1g/ml，并消毒灭菌，4℃保存，备用。
　　将360只1日龄健康肉仔鸡随机分成12组，每组30只，即正常对照组、感染对照组、方一预防组、方二预防组、方三预防组、方四预防组、庆大预防组、方一治疗组、方二治疗组、方三治疗组、方四治疗组和庆大治疗组。
　　预防组1日龄雏鸡常规饲养预饲3d后（第4d），中药预防组将4个中药复方制剂分别按饲料1％的比例混入各对应组饮水中，分上、下午2次给药，连续饮用12d。庆大预防组常规饲养第9d混饮庆大霉素注射液2000IU/只/次，2次/日，连续饮用6d；复方中药组用药第7d、庆大预防组用药第2d和感染对照组同时每只鸡胸肌注射大肠杆菌菌液1mL(含菌量为5.40×106/mL)攻毒，正常对照组不攻毒，不喂药，胸肌注射生理盐水1ml，观察10d，统计发病数、死亡数和存活数。
　　治疗组常规饲养至10d的雏鸡胸肌注射大肠杆菌液1.00ml/只攻毒，攻毒后中药治疗试验组鸡立即按饲料的2%给药，2次/日，混饮，每天上、下午各1次，连用6d；庆大霉素治疗组鸡立即混饮庆大霉素4000IU/只/次，2次/日，上、下午各1次，连用6d；正常对照组胸肌注射生理盐水(1.00ml/只)，观察10d，统计发病数、死亡数和存活数。
　　通过对四种中药组方预防和治疗效果比较，结果表明方二（即加味白头翁汤）的效果最好，确定为本研究的最佳中药组方。
　　2.加味白头翁汤最佳临床用量的确定
　　将300只1日龄健康肉仔鸡随机分成10组，正常对照组、感染对照组、方二预防低剂量组、方二预防中剂量组、方二预防高剂量组、庆大预防组、方二治疗低剂量组、方二治疗中剂量组、方二治疗高剂量组和庆大治疗组，每组30只。
　　用高、中、低三个不同剂量的方二对人工感染肉仔鸡大肠杆菌病进行治疗和预防保护性试验，肉仔鸡处理方法同前。
　　结果表明使用高、中、低不同剂量的加味白头翁汤，均可降低鸡的发病率和死亡率，通过防治效果比较，加味白头翁汤中剂量为最佳剂量（预防量为饲料的0.75%、治疗量为饲料的1.5%）。
　　3.加味白头翁汤抗大肠杆菌机理
　　将240只1日龄健康肉仔鸡随机分成8组，每组30只，正常对照组、感染对照组、方二中剂量预防组、方二高剂量预防组、庆大预防组、方二中剂量治疗组、方二高剂量治疗组、庆大治疗组。肉仔鸡处理方法同前。测定以下指标：
　　方二对肉仔鸡生长性能的影响：分别在药物预防阶段0d、3d、6d时，每只鸡称重，称料，计算每组试验鸡平均增重和平均累积料肉比。与正常对照组比较计算相对增重率。分别在接种大肠杆菌后（药物治疗阶段）0d、3d、6d、9d、12d、15d时，每只鸡称重，计算每只鸡的平均增重；并与感染对照组比较计算相对增重率。
　　方二对肉仔鸡血液生化指标的测定：分别在接种大肠杆菌后，0d、3 d、6d、9d、12d、15d，每组随机取试验鸡5只分别无菌心脏采集血液5ml，血液经离心机3000r/min离心，取其血清，测定雏鸡血液中转氨酶的活性；雏鸡血液中蛋白的含量。
　　方二对肉仔鸡抗氧化能力的测定：取肝匀浆上清液，检测肉仔鸡攻毒后0d、3d、6d、9d、12d、15d SOD的活性和MDA的含量。
　　方二对肉仔鸡免疫功能的影响：于预防用药后0d、3d、6d从4组试验鸡分别随机抽取5只，无菌采心血分离外周血单个核细胞（PBMC），测定T淋巴细胞、B淋巴细胞的活化情况；Ea一玫瑰花环的形成率的影响；红细胞C3b受体（E-C3bRR）花环形成率的影响。
　　结果表明加味白头翁汤能显著提高病鸡相对增重率、SOD活性、鸡血清蛋白（总蛋白、白蛋白和球蛋白）含量、T淋巴细胞转化率、Ea-玫瑰花环形成率、红细胞C3b受体（E-C3bRR）花环形成率；显著降低肉仔鸡血清谷丙转氨酶（Alt）、谷草转氨酶活性（Ast）、Ast/Alt比值、肝脏中MDA含量。
　　上述结果表明，本研究中所选择的四种中药处方中，以处方2即“加味白头翁汤”对大肠杆菌病鸡具有显著的防治效果，最佳预防量为饲料的0.75%、治疗量为饲料的1.5%。其较好的疗效可能与加味白头翁汤可提高肉鸡生长性能、抗氧化能力及免疫能力有关。

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1 引言

1.1 大肠杆菌及肉仔鸡大肠杆菌病的研究概况

1.2 抗生素治疗大肠杆菌引起的鸡大肠杆菌病存在的问题

1.3 关于抗氧化物酶的研究概况

1.4 中药防治疾病的研究进展

1.5 本项目研究的目的意义

2 材料与方法

2.1 试验一 药方筛选

2.2 试验二 “加味白头翁汤”最佳临床用量的确定

2.3 试验三 “加味白头翁汤”抗大肠杆菌机理

3 结果

3.1 抗大肠杆菌最佳中药组方的筛选结果

3.2 “加味白头翁汤”最佳临床用量的确定结果

3.3 “加味白头翁汤”抗大肠杆菌机理结果

4 讨论

4.1 抗大肠杆菌最佳中药组方的筛选

4.2“加味白头翁汤”最佳临床用量的确定

4.3 “加味白头翁汤”抗大肠杆菌机理

5 结论

参考文献

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