豆芽中6-苄氨基腺嘌呤检测方法研究

摘要

6-苄氨基腺嘌呤（6-Benzylaminopurine）白色针状结晶，难溶于水，微溶于乙醇，可溶于酸性及碱性溶液中。属于第一个人工合成的细胞分裂素，具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质分解，保绿防老的作用。目前常用于蔬菜、水果的保鲜和无根豆芽的培育。它在植物体内含量甚微但它对植物的生长发育具有显著的影响，其主要作用是促进细胞的分裂和扩大促进侧芽的发育抑制衰老等，具有诱导同化物向施用部位定向运输的作用。它在细胞分裂素中活性最高。6-苄氨基腺嘌呤作为促长剂和保鲜剂的主要成分，已在国内外进入应用阶段。作为植物促长剂使用，6-BA能提高种子发芽率，促进幼苗生长，最终提高产率，常被用于促进豆芽的生长，提高烟叶的产量等。
　　人体通过食物链摄入过多6-BA，会刺激食道、胃黏膜，造成损伤，出现恶心、呕吐等现象。为了保证进出口食品添加剂6-苄氨基腺嘌呤质量和安全使用，维护消费者的利益，有必要尽快制定相应的质量检验标准，指导相关企业生产、改进生成工艺、加强生产管理；为探索适合我国相关生产企业特点的安全防护计划等方面提供可靠的依据,确保进出口食品添加剂检验检疫监管的有效实施，保证6-苄氨基腺嘌呤的质量和进出口贸易工作的顺利进行，建立一种快速准确测定豆芽中6-苄氨基腺嘌呤质量的方法，在生化、农业、食品行业和进出口行业中都具有很重要的意义。
　　本文研究了微波辅助提取高效液相色谱检测蔬菜中6-苄氨基腺嘌呤中残留量的方法。分别介绍紫外分光光度法、高效液相色谱法及豆芽中6-苄氨基腺嘌呤微波提取工作原理及主要应用领域；建立了高效液相色谱法和紫外分光光度法测定6-苄氨基腺嘌呤产品含量的标准方法。实验中高效液相色谱法测得的平均含量为98.49％，S为0.20；紫外分光光度法为测得的平均含量为98.25%，S为0.14，经过F检验和T检验证明高效液相色谱法与紫外分光光度法精密度之间无显著性差异，两种方法之间无系统误差，即两种方法均可用于6-苄氨基腺嘌呤质量的测定。
　　探讨了微波辅助提取高效液相色谱检测蔬菜中6-苄氨基腺嘌呤残留量的方法。对蔬菜样品中残留的6-苄氨基腺嘌呤采用了两种提取方法，即微波提取和超声提取，讨论了两种提取方法中液固比、提取时间和温度对6-BA提取产率的影响，其中UE法提取绿豆芽样品中的6-BA残留量实验条件为液固比为4:1，提取时间为30min，测得提取产率为0.3765μg/g，其RSD%均小于1.9，重现性良好，回收率在84.85～86.57%之间；MAE条件法提取绿豆芽样品中的6-BA残留量实验条件为液固比为4:1，提取时间10min，提取温度60℃，测得提取产率为0.7213μg/g，其RSD均小于3.8%，分析结果重现性良好，回收率在93.92%～96.46%之间。实验表明：微波提取具有耗时短、提取产率高的优点，更适用于蔬菜中6-BA的提取。方法检出限为0.019mg/kg；方法回收率为93.92～96.46%，RSD＜5.7%，此方法可用于豆芽中6-BA残留量的测定。

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1 前言

1.1 6-苄氨基腺嘌呤简介

1.2 6-BA质量检测方法的研究

1.3 紫外分光光度法

1.4 高效液相色谱法

1.5 微波提取技术与超声提取技术

2 材料与方法

2.1 紫外可见分光光度法测定6-BA

2.2 高效液相色谱法测定6-BA含量

2.3 6-BA的提取

3结果与分析

3.1 6-苄氨基腺嘌呤紫外吸收光谱特性

3.2 HPLC测定6-BA

3.3 6-BA的提取

4结论

参考文献

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