卫气补对老年鼠免疫、抗氧化功能的影响及其急、慢性毒理试验研究

摘要

中药是传统医学的瑰宝。大量研究证实，许多中药具有增强机体免疫力、抗氧化、抗肿瘤的功效，本试验以卫气补(WQB)为研究对象，研究其对老年鼠的免疫及抗氧化功能的影响。通过急、慢性毒性试验，研究WQB对青年鼠的安全性，为WQB的临床应用提供理论依据。
　　研究中药复方卫气补(WQB)对老年鼠免疫指标及抗氧化功能的影响。50只12月龄的老年鼠，随机分为5组，其中A组为对照组，B组饲喂10mg/kg BW左旋咪唑组，C、D、E组分别为0.1％、1％、2％ WQB组，另取10只2月龄青年鼠作为F组，正常饲喂。分别按照上述分组饲喂30d。结果显示，与对照组及左旋咪唑组相比，饲料中添加1％ WQB能够增加老年鼠体重及免疫器官肝、脾、胸腺指数，显著提高鼠体内SOD以及IL-2水平并降低MDA含量(P＜0.05，P＜0.01);增加空肠粘膜固有层CD4+阳性细胞数量、抑制CD8+阳性细胞的表达，增加十二指肠sIgA细胞的表达量;饲料中添加1％、2％ WQB均能显著提高老年鼠血清中IFN-γ含量，并达到青年鼠水平。
　　为评价WQB安全性，进行WQB急性毒性试验研究。将80只2月龄青年鼠随机分为7个剂量组分别为2 mL/kg BW、2.80 mL/kg BW、3.92 mL/kg BW、5.49 mL/kgBW、7.68 mL/kg BW、10.76 mL/kg BW、15.06 mL/kg BW及1个灌服生理盐水的空白对照组，灌服1周后，各组小鼠均表现正常，没有死亡情况，因此又进行最大耐受剂量试验(MTD)，灌服剂量为30.12 mL/kg BW，相当于每只小鼠灌服0.9g原药。饲喂1周后，小鼠表现正常，无死亡情况。取上述9组小鼠肝、肾器官称重;由于在急性毒性试验期间，WQB各组小鼠没有死亡，所以摘取15.06 mL/kg BWWQB组、空白对照组及MTD组小鼠肝、脾、肺、肾、十二指肠等器官，观察其组织结构;眼眶采血，测定血常规。结果表明，各组小鼠肝、肾系数之间在0.05和0.01水平上无统计学意义;15.06 mL/kg BW WQB组及MTD组小鼠脏器组织结构与空白对照组小鼠相比，结构正常;血常规指标如MID（中间细胞）、LYM（淋巴细胞）、RBC(红细胞)、HGB(血红蛋白)检测结果，各组均无显著性差异（P＞0.05）。
　　为评价WQB安全性，进一步进行WQB慢性毒性试验研究。将15只2月龄青年鼠随机分为3组，分别为空白对照组:正常饲喂;阳性对照组:饲喂10 mg/kg BW苯丙左旋咪唑;1％WQB组:在饲料中加拌1％ WQB。饲喂90d后取材，摘取肝、肾组织并称重;由于在慢性毒性试验期间，小鼠没有死亡，所以选取空白对照组、1％ WQB组小鼠肝、脾、肺、肾、十二指肠组织固定，用于观察组织结构。眼眶采血用于血生化指标甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)、葡萄糖(GLU)、尿酸(UA)、肌酐(Crea)、丙氨酸转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、天冬氨酸转氨酶(AST)的检测。结果表明，各组小鼠生长良好，灌服1％ WQB组小鼠免疫器官指数及体重变化与正常对照组及苯丙左旋咪唑组相比，无显著性差异;1％WQB组小鼠与正常对照组小鼠脏器组织结构相比，无变化;1％WQB组小鼠血生化指标与空白对照组和苯丙左旋咪唑组小鼠相比，差异不显著（P＞0.05）。
　　本试验表明饲料中加入1％ WQB可提高老年鼠免疫力及抗氧化能力，且安全无毒。

目录

声明

摘要

缩略词

1 引言

1．1 常用免疫增强剂

1．1．1 维生素以及微量元素

1．1．2 化学合成类药物

1．1．3 微生物类药物

1．1．4 生物类药物

1．1．5 中草药及其多糖类

1．2 中药对机体免疫应答功能的影响

1．2．1 对免疫器官的影响

1．2．2 中药的抗炎作用

1．2．3 对单核-巨噬细胞系统的影响

1．2．4 对细胞免疫的影晌

1．2．5 对体液免疫的影响

1．2．6 对补体系统的影响

1．3 卫气补组成及安全性

1．4 中药安全性评价

1．4．1 中药安全性评价方法

1．4．2 中药组方及安全性

1．5 本研究的目的及意义

2 材料与方法

2．1 试验材料

2．1．1 试验动物

2．1．2 试验药物及试剂

2．1．3 试验仪器

2．2 试验方法

2．2．1 WQB对老年鼠免疫、抗氧化功能的影响

2．2．2 WQB急性毒性试验

2．2．3 WQB慢性毒性试验

2．3 数据处理

3 结果

3．1 WQB对老年鼠免疫、抗氧化功能的影响

3．1．1 对老年鼠体重的影响

3．1．2 对老年小鼠肝、脾、胸腺指数的影响

3．1．3 空肠CD4+、CD8+及十二指肠sIgA的表达

3．1．4 对老年小鼠肝组织中MDA、SOD含量的影响

3．1．5 对老年小鼠血清中IFN-Y及IL-2含量的影响

3．2 WQB急性毒性试验结果

3．2．1 小鼠死亡数及LD50结果

3．2．2 最大耐受剂量(MTD)试验结果

3．2．3 对免疫器官指数的影响

3．2．4 对小鼠脏器组织结构的影响

3．2．5 对小鼠血常规指标的影响

3．3 WQB慢性毒性试验结果

3．3．1 对小鼠一般状态的影响

3．3．2 对小鼠血生化指标的影响

3．3．3 对小鼠脏器指数的影响

3．3．4 对小鼠体重的影响

3．3．5 对小鼠脏器组织结构的影响

4 讨论

4．1 对老年鼠免疫、抗氧化功能的影响

4．1．1 对小鼠免疫器官指数及体重的影响

4．1．2 对老年小鼠CD4+、CD8+及slgA的影响

4．1．3 对老年小鼠肝组织中MDA、SOD含量的影响

4．1．4 对老年小鼠血清中IFN-γ及IL-2含量的影响

4．2 WQB急性毒性试验

4．2．1 对免疫器官指数的影响

4．2．2 对小鼠组织器官结构的影响

4．2．3 对小鼠血常规的影响

4．3 WQB慢性毒性试验

4．3．1 对小鼠一般状态的影响

4．3．2 对小鼠血生化指标的影响

4．3．3 对小鼠体重及免疫器官指数的影响

4．3．4 对小鼠脏器组织结构的影响

5 结论

参考文献

作者简历

致谢