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河南、安徽省玉米弯孢霉叶斑病病原菌优势种群分析及其防治

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摘要

1.1 玉米弯孢霉叶斑病的概况

1.1.1 玉米弯孢霉叶斑病的发生与危害

1.1.2 玉米弯孢霉叶斑病的症状表现

1.1.3 玉米弯孢霉叶斑病的发病规律

1.1.4 玉米弯孢霉叶斑病菌致病机理

1.1.5 发病诱因

1.2 玉米弯孢霉叶斑病病原菌种类的鉴定

1.2.1 弯孢属真菌的形态学研究概况

1.2.2 弯孢属及其相似属

1.2.3 玉米弯孢霉叶斑病病原菌的类型

1.3 弯孢属的分子生物学研究概况

1.4 生物学特性研究

1.5 玉米弯孢霉叶斑病防治现状

1.5.1 抗性品种的选育与利用

1.5.2 农业防治

1.5.3 化学防治

1.5.4 综合防治

1.6 本研究的目的和意义

2.1.1 供试培养基

2.1.2 供试培养基

2.1.3 试验仪器

2.1.4 试验试剂

2.2 试验方法

2.2.1 病原菌的分离及单孢纯化

2.2.2 病原菌的致病性测定

2.2.3 病原菌的形态学鉴定

2.2.4 病原菌的分子生物学鉴定

2.2.5 病原菌生物学特性研究

2.2.6 五种杀菌剂对病原菌的室内毒力测定及田间防效试验

3.1 病原菌分离及鉴定

3.1.1 2013年玉米弯孢霉叶斑病的发生特点及病原菌分离

3.1.2 病原菌形态学鉴定

3.1.3 分离菌株的致病性

3.1.4 分离菌株的ITS序列PCR扩增及分析

3.1.5 分离菌株的ITS、GPD、EF-1α、LSU序列PCR扩增及分析

3.2 病原菌生物学特性

3.2.1 病原菌对碳源的利用

3.2.2 病原菌对氮源的利用

3.2.3 不同温度对菌丝生长及产孢的影响

3.2.4 不同酸碱度对菌丝生长及产孢的影响

3.2.5 不同光照对菌丝生长及产孢的影响

3.3 五种杀菌剂对病原菌的室内毒力及田间防效

3.3.1 五种杀菌剂对病原菌的室内毒力

3.3.2 五种杀菌剂对病害的田间防治效果

4.1 病原菌的分离与鉴定

4.2 病原菌生物学特性

4.3 杀菌剂对病原菌的室内毒力及田间防效

5 结论

参考文献

作者简介

致谢

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摘要

玉米弯孢霉叶斑病(Curvularia leaf spot of maize)是世界普遍发生的玉米叶部病害。目前已经成为我国玉米生产上的重要叶部病害之一。由于其病原菌种类较多,而且我国报道的主要致病菌新月弯孢的孢子形态和致病性变异较大,给生产实践和研究工作造成很大困扰。本文对河南、安徽省玉米弯孢霉叶斑病病原菌优势种群及其生物学特性进行研究,并采用5种常用杀菌剂进行室内毒力及田间药效试验,以期获得防治该病害的有效药剂,更好地控制该病害。主要结果如下:
  1、从河南和安徽两省采集的玉米弯孢霉叶斑病病叶上分离得到2种形态不同的弯孢属菌株,将其分别命名为典型弯孢和“长椭圆形”弯孢,其中典型弯孢7株,分离比率为4.7%;“长椭圆形”弯孢142株,分离比率为95.3%。典型弯孢多数孢子具有第三个细胞膨大、弯曲成新月状的典型特征;而“长椭圆形”弯孢多数孢子在第三个细胞较大,但并不弯曲成新月状,而是呈梭形,两端渐狭,褐色,具3个隔膜,两端细胞颜色浅,16.3~33.0×3.0~11.7 μm,脐点平截,分生孢子梗单生或丛生于培养基上,褐色,不分枝,有隔膜,顶端色浅,产孢区合轴式延伸,产孢痕明显,长可达150μm,宽2.0~5.0 μm。分子生物学鉴定发现2种弯孢属菌株均与新月弯孢100%同源。根据形态学和分子生物学鉴定结果,确认这2种菌株均为新月弯孢(Curvularia lunata)。致病性测定试验表明,“长椭圆形”新月弯孢的致病力普遍比典型新月弯孢强,且同种弯孢菌的不同菌株之间致病性存在差异。
  2、明确了2种新月弯孢菌株生物学特性。典型新月弯孢和“长椭圆形”新月弯孢菌丝生长和产孢温度范围为10~40℃,菌丝生长最适温度分别为30℃和35℃;最适碳源均为可溶性淀粉;最适氮源均为有机氮(甘氨酸和脯氨酸);最适pH值范围分别为7.0~10.0和7.0~8.0;全光照条件下有利于菌丝生长,全黑暗条件下有利于产孢。同种弯孢菌的不同菌株之间的生物学特性存在差异。
  3、筛选获得了有效的防治弯孢霉的化学药剂。5种常用杀菌剂对2种新月弯孢的室内毒力测定表明,苯醚甲环唑、丙环唑和吡唑醚菌酯对2种新月弯孢菌丝生长的抑制效果较好,嘧菌酯和甲基硫菌灵对2种新月弯孢菌丝生长均无明显抑制效果。苯醚甲环唑和丙环唑2种药剂对典型新月弯孢的EC50值小于“长椭圆形”新月弯孢的EC50值。对“长椭圆形”新月弯孢的田间防效试验显示,甲基硫菌灵的防治效果最好,其次为吡唑醚菌酯,防效分别为50.88%和35.79%。
  本研究明确了河南、安徽省玉米弯孢霉叶斑病病原菌优势种群,并对优势种群的代表菌株进行生物学特性研究,发现两种新月弯孢的生物学特性存在差异,“长椭圆形”新月弯孢菌丝生长的最适温度为35℃,该菌更喜高温,致病性更强;5种测试药剂中甲基硫菌灵的防治效果最好,持效期较长,是防治该病害的有效药剂。

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