重组干扰素对犬疫苗免疫影响及细小病毒病的疗效研究

摘要

犬细小病毒病和犬瘟热是危害养犬业的两大主要传染病，目前免疫接种有失败情况，临床治愈率低。干扰素(IFN)是优良的抗病毒、抗肿瘤以及调节免疫的细胞因子，在动物的疾病治疗领域得到了广泛应用，但犬类研究尚不充分，多局限于制备、检测方法和生物学效价的评价，临床应用报道很少。为探究干扰素对犬疫苗免疫的影响及对犬细小病毒病的治疗效果，本试验以6～8周龄的健康比格犬为研究对象，使用由真核生物毕赤酵母菌，经基因工程方法提纯获得的犬重组干扰素，分别以不同剂量处理常规疫苗免疫犬，并于疫苗免疫后的0d、3d、7d、14d采用ELISA方法测定犬细小病毒抗体和犬瘟病毒抗体水平变化，观察犬重组扰素对犬疫苗免疫的影响;以细小病毒病犬的粪便提取病毒液，复制犬细小病毒病例，分别采用不同剂量的犬重组干扰素对病犬进行分组治疗试验，并配合支持和对症治疗，通过临床检查和血液生理生化指标观察治疗效果，为犬细小病毒病和犬瘟热的防治提供理论依据。
　　试验结果表明:高剂量犬重组干扰素+疫苗组(Ⅲ组)于首免、二免、三免的第14d，犬细小病毒血清抗体最低，分别为(160.75±2.75)ng/mL，(196.50±2.64)ng/mL，(256.00±6.68)ng/mL;中剂量犬重组干扰素+疫苗组(Ⅳ组)高达(214.00±2.58)ng/mL，(315.25±1.70)ng/mL，(462.25±3.77)ng/mL;低剂量犬重组干扰素+疫苗组(Ⅴ组)高达(228.25±2.75)ng/mL，(363.25±2.21)ng/mL，(541.75±2.62)ng/mL;均极显著高于生理盐水组(Ⅰ组)(160.50±2.08)ng/mL，(64.75±1.70)ng/mL，(48±1.83)ng/mL(P＜0.01);三免结束干扰素各组极显著低于疫苗组(Ⅱ组)(676.5±2.38)ng/mL(P＜0.01)。Ⅲ组、Ⅳ、Ⅴ组比较，Ⅴ组犬细小病毒病血清抗体水平极显著高于Ⅲ、Ⅳ组。免疫结束，犬瘟热病毒抗体水平变化和犬细小病毒血清抗体水平变化规律基本一致。可见，疫苗组免疫抗体水平最高，犬重组干扰素对疫苗免疫有抑制作用。
　　对复制成功细小病毒病犬分组治疗结果，治疗的第7d高剂量治疗组+对症和支持治疗组(Ⅵ组)血液红细胞数(RBC)显著高于中剂量治疗组+对症和支持治疗组(Ⅴ组)(P＜0.05)，极显著高于对症和支持治疗组(Ⅲ组)(P＜0.01)。Ⅵ组血液血小板数(PLT)极显著高于Ⅲ组(P＜0.01)。各组白细胞数(WBC)比较差异不显著(P＞0.05)。Ⅴ、Ⅵ组血清肌酸激酶(CK)活性显著低于Ⅲ组(P＜0.05)。血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性差异不显著(P＞0.05)。低、中、高剂量治疗组+对症和支持治疗组之间比较血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性差异不显著(P＞0.05)，但均显著低于对症和支持治疗组(Ⅲ组)(P＜0.05)。Ⅲ组死亡率40％，治愈率20％;Ⅳ组死亡率20％，治愈率80％。Ⅳ、Ⅴ组死亡率0％，治愈率100％。可见，高剂量犬重组干扰素临床治疗效果最好。

目录

声明

摘要

1引言

1．1 犬重组干扰素研究进展

1．1．1 干扰素的来源与产生

1．1．2 干扰素的理化性质、基因结构与分类

1．1．3 犬重组干扰素的制备

1．1．4 犬重组干扰素的生物活性检测

1．1．5 犬重组干扰素的生物学特性

1．1．6 犬重组干扰素的应用前景与展望

1．2 犬重组干扰素对疫苗免疫的影响

1．2．1 干扰素的免疫调节作用

1．2．2 干扰素作为免疫佐剂对疫苗的免疫抑制作用

1．2．3 干扰素作为免疫佐剂对疫苗的免疫增效作用

1．3 重组干扰素对犬细小病毒病的治疗

1．3．1 犬细小病毒概况

1．3．2 犬细小病毒病的特征及临床表现

1．3．3 重组干扰素的对犬细小病毒病的治疗进展

1．4 本研究目的和意义

2．1 试验动物

2．2 主要仪器、试剂及用品

2．3 犬重组干扰素对犬细小病毒及犬瘟热病毒疫苗免疫的影响

2．3．1 试验动物分组与处理

2．3．2 犬瘟热病毒和犬细小病毒血清抗体检测

2．4 犬细小病毒病的复制

2．4．1 犬细小病毒的提取

2．4．2 犬细小病毒病的模型复制

2．5 犬重组干扰素对犬细小病毒病的治疗

2．5．1 试验动物分组与治疗

2．5．2 犬细小病病毒病疗效判断标准

2．6 试验数据采集及数据处理

3 试验结果

3．1 重组干扰素对犬细小病毒和犬瘟热病毒疫苗免疫效果的影响

3．1．1 重组干扰素对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响

3．1．2 重组干扰素对犬瘟热病毒疫苗免疫效果的影响

3．2 犬细小病毒病模型复制结果

3．2．1 犬细小病毒病模型复制预试验结果

3．2．2 犬细小病毒病模型复制正试验结果

3．3 重组干扰素对犬细小病毒病的治疗

3．3．1 重组干扰素对犬细小病毒病治疗临床表现评分

3．3．2 重组干扰素对细小病毒病犬治疗前后血常规指标变化

3．3．3 重组干扰素对细小病毒病治疗前后血清生化指标变化

3．3．4 重组干扰素对犬细小病毒病治疗各组犬发病及治疗情况

4 讨论

4．1 犬重组干扰素对疫苗免疫的影响

4．1．1 犬重组干扰素对犬细小病毒疫苗免疫的影响

4．1．2 犬重组千扰素对犬瘟热病毒疫苗免疫的影响

4．2 犬重组干扰素对犬细小病毒病的治疗

4．2．1 犬细小病毒病的复制

4．2．2 犬细小病毒病的病程变化

4．2．3 犬细小病毒病的血常规指标变化

4．2．4 犬细小病毒病的血液生化指标变化

5结论

参考文献

作者简历

致谢