PARP抑制剂、盐霉素、依维莫司、舒尼替尼对乳腺癌BT-20干细胞抑制作用的初步研究

摘要

背景：
　　肿瘤干细胞学说认为，恶性肿瘤中的干细胞亚群具有自我更新和多项分化的能力，是恶性肿瘤复发、转移的根本原因[1]。聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(poly ADP-ribosepolymerase，PARP)在细胞中的主要功能为对损伤、断裂的DNA链进行识别和修复，临床上对乳腺癌进行的放疗、化疗的主要作用机制即为损伤和破坏肿瘤细胞的DNA，从而造成肿瘤细胞的死亡，PARP被认为是导致恶性肿瘤对放疗、化疗产生抗性的重要原因，所以它也成为了治疗乳腺癌的一个新靶点。盐霉素是一种已经经实验证实的对乳腺癌干细胞具有杀伤作用的药物[2]。依维莫司是一种哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂，临床主要用于器官移植后的免疫抑制及抗肿瘤应用。舒尼替尼是一种多靶点酪氨酸激酶抑制剂，临床上主要用于晚期肾细胞癌(renal cell carcinoma，RCC)和胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor, GIST)的治疗。
　　目的：
　　分别对经过PARP抑制剂、盐霉素、依维莫司、舒尼替尼处理后的乳腺癌细胞和未经过药物处理的空白组细胞中的干细胞亚群进行标记，对比两组细胞中干细胞群所占比例，探究各种药物对腺癌干细胞有无抑制作用。
　　方法：
　　取三阴性乳腺癌细胞株BT-20细胞，用不同浓度的5种药物分别对BT-20细胞进行处理，计算出各种药物的半数抑制浓度，从中挑选出各自药物的合适浓度（对BT-20细胞的抑制率为10％左右），用5种药物对BT-20细胞再次进行处理，ALDEFLUOR试剂标记出加药细胞组和未加药细胞的ALDH1+细胞，利用流式细胞仪检测并对比两组细胞间ALDH1阳性细胞比例，检验药物对干细胞亚群的抑制作用。
　　结果：
　　Veliparib、Olaparib、Iniparib、盐霉素、依维莫司、舒尼替尼的IC50分别为32.23、38.65、35.12、7.21、5.73、7.85μmol/L。未加药组细胞中的ALDH1+细胞比例为（19.34±1.15）％，实验组细胞中的ALDH1+细胞比例为（盐霉素，1μmol/L）（10.87±2.24）％;（盐霉素，2μmol/L）(6.33±1.52)％;(Olaparib，10μmol/L)（8.45±0.56）％;(Veliparib,10μmol/L)(13.27±2.14)％;(Iniparib,10μmol/L)(6.83±2.67)％;（依维莫司，1μmol/L）（9.82±1.74）％;（舒尼替尼，1μmol/L）（7.87±2.52）％。实验组细胞的ALDH1+细胞比例显著降低，(P＜0.05)。
　　结论：
　　经PARP抑制剂(Veliparib、Olaparib、Iniparib)、盐霉素、依维莫司、舒尼替尼作用后的BT-20细胞中ALDH1+细胞比例明显降低，以上药物对乳腺癌细胞株BT-20中的干细胞亚群有直接抑制作用。

目录

声明

摘要

1 前言

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．2 试剂的配置

2．3 实验方法

2．4 统计学分析

3 结果

3．1 各种药物对BT-20细胞的作用

3．2 各种药物作用于BT-20细胞48h后对ALDH1阳性表达率的影响

4 讨论

5 小结

参考文献

综述 乳腺癌干细胞的研究进展

附录

攻读学位期间发表文章情况

致谢

个人简历