交直流复合磁场对小鼠胚胎成纤维细胞节律性相关基因的影响

摘要

随着国民经济的飞速发展，为满足工业生产及生活设施对电力的巨大需求,我国建设了和正在建设诸如，全国电力信息联网，西部电力输送到需求大的东部，骨干线路电力特高压输送，加快了跨区域联网的步伐。另外，我们所生活的电磁环境日益复杂，促使人们更加关注电磁暴露对健康的影响。本文以小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）为研究对象，在不同磁场暴露模式下，利用分子生物学手段研究和分析交流磁场、交直流复合磁场对细胞节律性相关基因的影响和机制。主要工作包括： 1、设计实验用辐照系统，该系统包括：电源模块、支撑模块、线圈模块，通过电源模块控制磁场的大小，从而产生实验所需的交流磁场和交直流复合磁场，用于后续节律性实验的研究。 2、交流磁场暴露模式下，选用小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）离体培养，通过cck-8试剂盒法，检测马血清刺激法和无血清刺激法对细胞增殖的影响；采用荧光实时定量PCR，检测细胞节律性相关基因表达量的变化，及生物节律周期的变化，分析该磁场条件下不同实验处理方法对细胞节律性相关基因的影响，得到的结论为：在交流磁场作用下，马血清刺激法不影响小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）的增值和period的节律周期，但是缩短了隐花色素基因的节律周期；无血清刺激法影响小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）的增值，但不影响隐花色素基因的节律周期，并且磁场暴露时间并不影响隐花色素基因的表达。 3、交直流复合磁场暴露模式下，选用小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）离体培养，采用cck-8试剂盒法，检测不同实验处理方法对细胞增殖的影响；采用荧光实时定量PCR，检测了交直流复合磁场暴露下隐花色素基因表达量的变化，分析交直流复合磁场对细胞节律性相关基因表达量的影响。结果表明：交直流复合磁场作用下，马血清刺激法影响细胞增值但不影响隐花色素基因的表达；无血清刺激法不影响小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）的增值也不影响隐花色素基因的表达。

目录

声明

第一章 绪论

1.1 课题的研究背景及意义

1.2 国内外研究现状

1.3 本论文主要研究内容

第二章 辐照系统

2.1磁场仿真软件ANSYS Maxwell特点及仿真流程

2.1.1ANSYS Maxwell的特点

2.1.2ANSYS Maxwell仿真计算流程

2.2ANSYS Maxwell边界条件

2.3 直螺线管

2.4 辐照系统的仿真

2.4.1 设计目的

2.4.2 线圈模块设计

2.4.3 辐照系统搭建

2.5 本章小结

第三章 交流磁场对小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）相关节律性基因的影响

3.1 实验材料

3.1.1 实验仪器

3.1.2 细胞来源

3.1.3 主要试剂

3.1.4 溶液配制

3.2 实验方法

3.2.1 细胞复苏

3.2.2 细胞的传代

3.2.3 细胞的扩大培养

3.2.4 细胞冻存

3.2.5 细胞总RNA 提取

3.2.6 反转录（cDNA第一链的合成）

3.2.7 荧光实时定量PCR

3.3 实验分组及处理方法

3.3.1 细胞增值

3.3.2 马血清刺激法

3.3.3 无血清刺激法

3.3.4 数据分析

3.4 交流磁场暴露下不同实验方法对细胞增值的影响

3.4.1马血清刺激法对NIH3T3细胞增值的影响

3.4.2无血清刺激法对NIH3T3细胞增值的影响

3.5交流磁场暴露下不同实验方法对节律周期及基因表达的影响

3.5.1马血清刺激法对隐花色素基因节律周期的影响

3.5.2马血清刺激法对period基因节律周期的影响

3.5.3无血清刺激法对隐花色素基因表达的影响

3.5.4无血清刺激法对隐花色素基因节律周期的影响

3.6讨论

3.7 本章小结

第四章 交直流复合磁场对隐花色素基因表达的影响

4.1 实验材料

4.1.1 实验仪器

4.1.2 细胞来源

4.1.3 主要试剂

4.1.4 溶液配制

4.2 实验分组及处理方法

4.2.1 细胞增殖

4.2.2 马血清刺激法

4.2.3 无血清刺激法

4.2.4 数据分析

4.3 交直流复合磁场暴露下不同实验方法对细胞增值影响

4.3.1马血清刺激法对NIH3T3细胞增值的影响

4.3.2无血清刺激法对NIH3T3细胞增值的影响

4.4交直流复合磁场下不同实验方法对隐花色素基因表达的影响

4.4.1马血清刺激法对隐花色素基因表达的影响

4.4.2无血清刺激法对隐花色素基因表达的影响

4.5 讨论

4.6 本章小结

第五章 工作总结与展望

5.1总结

5.2本文主要创新点

5.3工作的展望

参考文献

攻读学位期间所取得的相关科研成果

致谢