纳米粒子探针的化学发光及共振光散射分析

摘要

核酸是重要的生命大分子，核酸的分析在生命科学研究中具有重要的意义。特别是脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic Acid，DNA），它是主要的遗传物质，具有重要的生物功能。核酸特殊序列及单碱基多态性（SNP）的检测，在临床诊断，病理分析，以及食品与药物检测，环境监测方面都有很重要的作用。所以开发高选择性、高灵敏度、快速、方便的DNA杂交检测方法显得越来越迫切。
　　 近年来金属纳米粒子在分子生物学领域的研究和应用受到广泛关注。金属纳米粒子以其独特的光谱性质和生物兼容性被广泛应运于对蛋白质，核酸等生命大分子的分析。
　　 在本文中，我们对标有寡聚核苷酸的银纳米粒子进行了定量测定，建立了一种标记寡聚核苷酸的银纳米粒子探针的化学发光检测方法。该方法操作简便，灵敏度高，可定量检测标有寡聚核苷酸的银纳米粒子，其线性范围为5×10-9～1×10-6 g/mL，检出限（3σ）可达到2.0×10-9/mL，为进一步的DNA杂交分析奠定了基础。
　　 我们还利用共振光散射技术对吸附单链DNA（ss-DNA）和双链DNA（ds-DNA）的金纳米粒子进行了研究。发现ss-DNA和ds-DNA有着不同的静电性质：ss-DNA可以直接吸附在柠檬酸包被的金纳米粒子上，并且能增强金纳米粒子的稳定性，防止它在盐溶液中的聚集；而ds-DNA不能吸附到金纳米粒子上，不能阻止金纳米粒子在盐溶液中的聚集。基于这一现象，我们建立了一种简单快捷的利用杂交检测特殊DNA序列的共振光散射方法。该方法得出共振光散射强度与目标DNA浓度在2 nmol/L～30 nmol/L范围内呈良好的线性关系，检出限为0.8 nmol/L。并且通过控制变性温度，可以区分单碱基错配靶序列与完全匹配靶序列，为单核苷酸多态性分析（SNP）开辟了一条新的途径。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章引言

1.1纳米粒子概述

1.2纳米粒子探针在DNA杂交分析中的应用

1.3化学发光在分析中的应用

1.4共振光散射在分析中的应用

第2章K2S2O8-luminol化学发光体系检测银纳米粒子寡聚核苷酸探针研究

2.1前言

2.2实验部分

2.3结果与讨论

2.4结论

第3章金纳米粒子与未标记的DNA作用的共振散射光谱研究

3.1前言

3.2实验部分

3.3结果与讨论

3.4结论

参考文献

硕士期间发表及待发表论文情况

致谢