涂覆型化学反光传感器的构建及其在过氧化氢葡萄糖测定中的应用

摘要

过氧化氢和葡萄糖是生物体系中重要的化学物质,影响着细胞功能和新陈代谢,与生命体的健康息息相关,因此如何快速检测生命体中过氧化氢和葡萄糖的含量,对于环境科学、生命科学以及临床医学都有着重要的意义。本论文在深入探究了以上两种物质研究现状的基础上,开发了一种简单、方便、灵敏的检测方法。化学发光分析因为其灵敏度高、分析速度快、容易实现自动化和连续分析及仪器设备便宜简单等特点,吸引着很多分析工作者的关注,已被成功的应用于药学、临床医学、分子生物学、生物技术和环境监测等领域中。具体内容如下:
　　1、以C-18修饰的多孔二氧化硅为基质,利用涂覆法将CPPO和红荧烯固定于多孔硅球的表面,得到化学发光探针。由于多孔硅球表面的C-18长链烷烃基团为强疏水物质,为CPPO和红荧烯提供了疏水的环境,使CPPO和红荧烯分子能在微球表面结合牢固。三嵌段多聚物Pluronic F-127(PF127)将疏水探针分散于水溶液中,使其具有亲水性能,有利于生物样品的检测。多孔硅球的比表面积大,提高了过氧化氢与发光试剂的接触面积,从而提高了该探针的工作效率。利用该探针对过氧化氢和葡萄糖进行了检测,过氧化氢浓度在10-6 mol/L—10-3 mol/L范围内与化学发光信号呈线性关系,线性范围宽,可达4个数量级。葡萄糖浓度在10-4 mmol/L—5 mmol/L范围内与化学发光信号呈很好线性关系,线性范围宽,适合于体内葡萄糖含量的检测。
　　该探针有效克服了过氧化草酸酯化学发光体系亲水性能差的缺点,并且在多孔硅球表面有效富集了发光活性物质,减小了CPPO和红荧烯的距离,提高了两者之间的能量转化效率,因此该探针具备生物兼容性好、发光效率高、强度大、寿命长等优点。
　　2、通过涂覆法制备得到了表面负载 CPPO和红荧烯化学发光活性物质的探针,利用疏水作用将葡萄糖氧化酶固定到该多孔硅球的表面,形成了固定化酶葡萄糖化学发光探针。使用该探针进行葡萄糖含量的测定,初步得到了比较满意的结果。

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第1章 前 言

1.1 过氧化氢的检测

1.2 葡萄糖的检测

1.3 本论文主要研究内容

第2章 涂覆型化学发光探针的制备

2.1 材料和方法

2.2 结果和分析

2.3 结论

第3章 化学发光传感器在过氧化氢检测中的应用

3.1 材料和方法

3.2 结果和讨论

3.3 结论

第4章 化学发光传感器在葡萄糖检测中的应用

4.1 材料和方法

4.2 结果与讨论

4.3 结论

第5章 固定化酶化学发光传感器的构建及其在葡萄糖检测中的应用

5.1 材料和方法

5.2 结果和讨论

5.3 结论

参考文献

致谢

攻读学位期间取得的科研成果