乌梅丸对免疫损伤性肝纤维化大鼠肝组织细胞因子TGF-β及其mRNA的影响

摘要

本文研究目的：通过观察乌梅丸对免疫损伤性肝纤维化大鼠的影响，探讨乌梅丸治疗肝纤维化的作用机理，进而阐明从厥阴论治慢性肝病的机理，挖掘治疗慢性肝病的中医新理论，为临床应用提供科学依据。 研究方法：实验采用猪血清腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型。雄性Wistar大鼠105只，随机分为7组，即正常组、模型组、秋水仙碱组、小柴胡汤组、乌梅丸大、中、小剂量组，每组15只；除正常组外，其余各组均用猪血清0.5ml/只，每周腹腔注射2次，连续8周制备大鼠肝纤维化模型。造模结束后，正常组和模型组给予生理盐水10ml/kg·d灌胃；小柴胡汤组给予小柴胡汤浓缩液灌胃，6g/kg·d；乌梅丸大、中、小剂量组分别给予乌梅丸12g/kg·d、8g/kg·d、4g/kg·d，水煎浓缩液灌胃，以上四组中药用量均按人与大鼠体表面积等效剂量折算，每日灌胃1次；秋水仙碱组给予秋水仙碱0.2mg/kg·d灌胃。治疗结束后，观察大鼠一般状态及体重；肝功能；细胞因子TGF-β1及TGF-β1mRNA表达量的变化。 研究结果： 1.一般情况以乌梅丸中剂量组最好，乌梅丸大、小剂量组次之，小柴胡汤组和秋水仙碱组最差。 2.与模型组相比，各用药组肝功能ALT、AST、ALP、TBIL均明显降低(P＜0.05)，乌梅丸各组对降低肝纤维化大鼠ALT、AST、ALP、TBIL作用优于其它治疗组(P＜0.05)，乌梅丸中剂量组降低上述指标的作用较大、小剂量组更为显著(P＜0.05)。各治疗组虽均能升高A/G，但各组差别不大(P＞0.05)。 3.采用免疫组化法检测TGF-β1，在肝纤维化过程中，TGF-β1的表达明显增加(P＜0.05)，秋水仙碱、小柴胡汤和乌梅丸均可明显降低TGF-β1的表达(P＜0.05)，乌梅丸各组优于秋水仙碱和小柴胡汤组(P＜0.05)，而乌梅丸中剂量组又优于乌梅丸大剂量和小剂量组(P＜0.05)。 4.采用原位杂交法检测TGF-β1mRNA，同模型组比较，秋水仙碱组、小柴胡汤组和乌梅丸各组TGF-β1mRNA的表达均明显降低(P＜0.05)，乌梅丸各组优于秋水仙碱和小柴胡汤组(P＜0.05)，而乌梅丸中剂量组又优于乌梅丸大剂量和小剂量组(P＜0.05)。 研究结论：乌梅丸具有明显的抗纤维化作用，作用优于秋水仙碱和小柴胡汤；在乌梅丸大、中、小剂量各治疗组中，尤以乌梅丸中剂量组效果最好。实验中乌梅丸能明显改善肝纤维化大鼠一般状况，秋水仙碱、小柴胡汤、乌梅丸均能改善肝纤维化大鼠病理改变；乌梅丸各治疗组较模型组细胞因子TGF-β1的表达明显受到抑制；TGF-β1mRNA转录亦明显得到抑制。这表明乌梅丸治疗肝纤维化的机制在于减少细胞因TGF-β1等的形成，促进细胞外基质的降解，从而实现对肝纤维化的治疗。 乌梅丸为厥阴正治之方，方中药物寒温并用，酸苦辛甘并施，用药独重乌梅，既能滋肝，又能泄肝，为“治厥阴防少阳护阳明之全剂”。通过实验研究证明，乌梅丸治疗肝纤维化效果满意，为临床治疗用药开辟了新思路。

目录

硕士学位论文原创性声明及硕士学位论文使用授权声明

摘要

前言

材料与方法

结果

理论探讨

结论

致谢

参考文献

附录1：病理图片

附录2：综述 肝纤维化的中医药研究