菟丝子黄酮、六味地黄丸对GTW损伤雄性幼鼠生育保护及睾丸Bcl-2/Bax表达影响的实验研究

摘要

目的:研究补肾中药菟丝子黄酮、六味地黄丸对雷公藤多苷(GTW)损伤雄性SD幼鼠生育能力的影响及其对GTW损伤雄性SD幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的表达的影响。
　　方法:实验1:选用健康3周龄SD雄性幼鼠100只,随机分为四组,空白组、雷公藤多苷组、六味地黄丸+雷公藤多苷组、菟丝子黄酮+雷公藤多苷组,每组25只。空白组每日灌服0.5％羧甲基纤维素钠溶液0.05ml/kg,雷公藤组每日灌服GTW溶液9mg/kg,六味组每日灌服六味地黄丸溶液1g/kg和GTW溶液9mg/kg,菟丝子组每日灌服菟丝子黄酮溶液0.1g/kg和GTW溶液9mg/kg。连续给药12周。末次给药后,开始进行合笼,将所有大鼠分笼喂养,每笼1只,按照1:1比例放入健康成年雌性大鼠1只,观察雌鼠体重明显增加或腹部膨隆则提出雄鼠单笼喂养,剩余继续合笼至2周(三到四个性动周期)仔鼠观察满三周处死,同时处死已生育实验鼠,观察雌鼠受孕情况、平均产仔天数、平均离乳存活率等情况。
　　实验2:选用健康3周龄SD雄性幼鼠48只,采用随机方法分为四组,每组12只。分组方法、给药剂量、疗程同实验一,于十二周末,末次给药后处死大鼠,取双侧睾丸。免疫组化法测定睾丸组织凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达。
　　结果:实验1:连续用药12周后,雷公藤多苷组所对应的雌鼠受孕率最低、平均产仔天数最长,空白组所对应的雌鼠受孕率较高、平均产仔天数最短,六味组和菟丝子组所对应的雌鼠受孕率最高、平均产仔天数较短,各组相比差异无统计学意义(P>0.05)。离乳存活率空白组最高,菟丝子组次之,六味组最低,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。
　　实验2:各实验组Bcl-2蛋白表达:雷公藤多苷组表达最少,与其他各组之间比较(P<0.05)差异有统计学意义。空白组表达最高,菟丝子组次之,空白组与中药组之间比较(P>0.05)差异没有统计学意义。六味组及菟丝子组之间比较(P>0.05)差异没有统计学意义。
　　各实验组Bax蛋白表达:雷公藤多苷组表达最高,与其他各组之间比较(P<0.05)差异有统计学意义。空白组表达最少,空白组与各中药组之间比较(P<0.05)差异有统计学意义。六味组及菟丝子组之间比较(P>0.05)差异没有统计学意义。
　　结论:六味地黄丸、菟丝子黄酮能对抗雷公藤多苷所致雄性幼鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达减少和Bax蛋白表达增强,增强雄性幼鼠生育能力,提高所对应雌鼠受孕率、离乳存活率,减少平均产仔天数。补肾中药可以促进雷公藤多苷致生殖损伤的恢复。

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前言

实验 1 菟丝子黄酮、六味地黄丸对 GTW 所致生殖损伤SD 雄性幼鼠生育能力的影响

材料与方法

1．材料

2．方法

3． 统计学处理

4． 结 果

实验 2 菟丝子黄酮、六味地黄丸对 GTW 所致生殖损伤SD 雄性幼鼠睾丸组织 Bcl-2/Bax 蛋白表达的影响

材料与方法

1．材料

2．方法

3． 统计学处理

4． 结 果

讨论

1. 雷公藤多苷导致生殖损伤的中医病机探讨

2． 导师应用 GTW 的经验及前期研究基础

3． 补肾中药的选择及其研究

4． 雷公藤多苷所致生殖损伤的病理机制分析

5． 细胞因子 Bax 与 Bcl-2 表达与睾丸细胞凋亡的关系

6． 实验结果分析

7． 存在问题及展望

结论

致谢

参考文献

附录 1：病理图片

附录 2：文献综述