仙连颗粒干预激素依赖型 ITP 患者剪接因子SRp30cmRNA及GRmRNA表达的研究

摘要

目的：研究仙连颗粒对发生GC依赖的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中GRαmRNA、GRβmRNA、SRp30c mRNA表达的影响,结合临床指标,探讨发生 GC依赖的ITP患者的GRα/GRβ的比例和SRp30c mRNA的分子生物学机制。
　　方法：选取符合诊断标准的激素依赖型 ITP 患者 40 例,均经正规糖皮质激素足量治疗(按患者的公斤体重计算每日的用量 1mg/kg,每日服三次)。将40例随机分入治疗组与标准对照组,治疗组20例,激素撤减过程中口服仙连颗粒,每日一剂。标准对照组20例,口服强的松片(用法用量同前),口服两个月为一个疗程,两个疗程后作疗效判定。疗程结束后观察两组患者显效、良效、进步、无效的情况和治疗前后紫斑出血、五心烦热、潮热盗汗、口干咽燥、神疲懒言、头晕乏力、心悸气短等临床症状积分变化以及外周血象、骨髓象及血清抗血小板抗体(PAIgG)的改善情况。同时选取20例健康志愿者作为正常对照组。采用RT-PCR方法检测入组前正常对照组以及治疗前后激素依赖组外周血单个核细胞(PBMC)中GRα、GRβ及SRp30c的mRNA表达水平,以及这种变化与激素依赖的关系。对结果进行统计学比较。
　　结果：①三组PBMC中GRα、GRβ及SRp30c mRNA的表达水平：三组PBMC中均有GRα、GRβ、SRp30c的mRNA的表达,GRαmRNA的表达量远远高于GRβmRNA,说明GR亚型中占主导地位的是GRα。②与正常对照组相比,ITP患者GRαmRNA表达量并无明显差异；标准对照组GRαmRNA表达比治疗组和正常对照组水平降低,但差异无统计学意(P>0.05)。③与正常对照组相比,ITP患者 GRβmRNA 和 SRp30c mRNA 的表达水平较高(P<0.05)；标准对照组 GRβmRNA和SRp30c mRNA的表达水平也明显高于治疗组(P<0.01)。④标准对照组患者 GRα/GRβ的比值较低,与治疗组和正常对照组相比,其差异有统计学意义(P<0.05)。
　　结论：①仙连颗粒能够降低激素依赖型 ITP 外周血单个核细胞中 GRβmRNA和SRp30c mRNA的表达水平,降低血清抗血小板抗体(PAIgG),提高对激素的敏感性。②治疗组、标准对照组、正常对照组中 GRαmRNA在PBMC中均有表达,但在强度和数量上 3 组之间 GRαmRNA 表达没有明显的差异。③标准对照组GRβmRNA和SRp30c mRNA的表达量均高于治疗组,说明GC的疗效与GRβmRNA及SRp30c mRNA表达呈负相关。④标准对照组GRα/GRβ的比值较治疗组和正常对照组低,说明标准对照组患者 PBMC中存在有GRα与GRβ表达的失衡。以上说明,GC 治疗的疗效与 GR 亚型在 PBMC 中表达的数量和强弱密切相关,GRβmRNA、SRp30c mRNA含量越高,表达越强,GRα/GRβ的比值越低,临床治疗效果越差。在调节GC疗效的敏感性指标中,细胞内GRα及GRβ表达的数量及比值可能起重要的作用。检测这些指标及相关的剪接因子 SRp30c mRNA的表达量可以为临床预测 GC治疗疗效提供重要参考。

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前言

对象与方法

1 观察对象

2 病例选择标准

3 分组、用药及疗程

4 观察指标

5 实验

6 统计和分析方法

结果

1 一般临床资料

2 PCR结果

3 临床疗效分析

讨论

1 ITP的病因及发病机制

2 关于ITP患者出现激素依赖的认识

3 导师的学术思想

4 仙连颗粒的组方原则及现代药理研究

5 结果分析

6 仙连颗粒作用机理的思考

7 问题与展望

结论

致谢

参考文献

附录

附录1 临床观察表

附录2 文献综述