系统性红斑狼疮患者血浆对间充质干细胞免疫抑制作用的影响

摘要

目的：探究系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）患者血浆对健康者骨髓来源的间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs）免疫抑制作用的影响。
　　方法：实验采用添加SLE患者富集血浆或胎牛血清的细胞培养体系（胎牛血清作为对照组），在体外共同培养SLE患者来源的B淋巴细胞与健康者骨髓来源的MSCs，检测MSCs对B淋巴细胞的增殖能力和分化成熟的影响。采用细胞增殖试验检测分析B淋巴细胞的增殖能力情况；使用流式细胞仪检测B淋巴细胞的表面标志物，统计分析B淋巴细胞的分化成熟情况。实验数据统计分析：采用SPSS12.0软件进行学生t检验统计学分析，P＜0.05视为两组差异有统计学意义。
　　结果：
　　1、MSCs的分离、扩增培养和诱导分化：实验成功培养获得健康骨髓捐献者来源的MSCs；①MSCs经过流式细胞仪检测结果显示，高表达CD44、CD73、CD90、和CD105，不表达CD34、CD45、CD14和CD106；②通过添加特殊诱导剂诱导培养MSCs后，成功分化为成脂细胞和成骨细胞。
　　2、正常MSCs可以抑制SLE患者来源B淋巴细胞的增殖（脂多糖为增殖刺激分子）。
　　3、SLE患者富集血浆能够抵制正常MSCs对SLE患者来源B淋巴细胞的增殖抑制作用（脂多糖为增殖刺激分子）。
　　4、正常MSCs可以抑制SLE患者来源B淋巴细胞的成熟：在胎牛血清培养系统中，加入MSC干预后，SLE患者来源B淋巴细胞表面CD27与CD38的表达量下调，CD19的表达水平无明显影响。
　　5、SLE患者富集血浆能够抵制正常MSCs对SLE患者来源B淋巴细胞成熟的抑制作用：在SLE患者富集血浆培养系统中，加入MSCs干预后，SLE患者来源B淋巴细胞表面CD27与CD38的表达量明显上调，CD19的表达水平受到抑制作用。
　　结论：正常MSCs可以抑制脂多糖刺激的SLE患者B淋巴细胞的增殖与成熟，调节B淋巴细胞亚群所占比例。而SLE患者富集血浆却能够抵制正常MSCs对B淋巴细胞的免疫抑制作用，这将负向干扰正常MSCs移植对SLE的治疗效果。

目录

缩略词表

第一章 前 言

1.1 MSCs的生物学与免疫学特性

1.2 MSCs对机体免疫细胞的调节作用

1.2.1 MSCs对T淋巴细胞的免疫调节作用

1.2.2 MSCs对B细胞的免疫调节作用

1.2.3 MSCs对其他免疫细胞的调节作用

1.3 SLE与MSCs

1.3.1 SLE的MSCs存在异常

1.3.2正常MSCs对SLE T/B淋巴细胞的调节

1.3.3 MSCs应用于SLE治疗

1.4小结

1.5 研究的目的及意义

第二章 系统性红斑狼疮患者血浆对间充质干细胞免疫抑制作用的影响

2.1.1 研究对象

2.1.2 实验分组

2.1.3 实验主要仪器

2.2实验试剂

2.2.1流式细胞仪检测试剂

2.2.2常用试剂与耗材

2.2.3 MSCs诱导分化培养及鉴定试剂

2.2.4常用溶液配置

2.3 实验方法

2.3.1 MSCs的分离、扩增培养以及鉴定

2.3.2 SLE患者混合血浆制备

2.3.3 B淋巴细胞的分离及培养

2.3.4 B淋巴细胞增殖能力检测

2.3.5 B淋巴细胞表面标志的检测

2.3.6 统计学分析

2.4 实验结果

2.4.1 MSCs的分离、扩增培养以及鉴定

2.4.2 B淋巴细胞增殖实验

2.4.3 MSCs对B淋巴细胞成熟的影响

2.5本章小结

第三章 讨 论

致谢

参考文献

在读期间发表论文、著作、申请专利情况：

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