应用黄药子煎剂灌胃建立小鼠肝损伤模型的初步研究

摘要

【目的】初步探索应用肝毒性中药黄药子煎剂灌胃建立小鼠肝损伤模型,并从脂质过氧化损伤方面分析其机制。
　　【方法】
　　(1)昆明种清洁级小鼠40只,体重18-22g,雌雄各半。随机分为4组：空白组、黄药子煎剂高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组10只。黄药子煎剂各组分别以240g·kg−1、120g·kg−1、60g·kg−1,按0.2mL·10g−1体重黄药子煎剂灌胃；空白组以等体积蒸馏水灌胃。每日1次,连续灌胃6d后处死,分别检测血清丙氨酸氨基转移酶( alanine aminotransferase , ALT )、天门冬氨酸氨基转移酶( aspertate aminotransferase,AST),计算肝指数,观察肝组织普通病理形态学变化,以探索黄药子煎剂致明显肝损伤的相对合适剂量。
　　(2)昆明种清洁级小鼠30只,体重18-22g,雌雄各半。随机分为3组：空白组、黄药子煎剂给药6d组、12d组,每组10只。黄药子煎剂组以探索出的相对合适剂量黄药子煎剂,按0.2mL·10g−1体重灌胃；空白组给予等体积蒸馏水灌胃。每日1次,给药组连续灌胃6d、12d后分别处死10只,分别检测血清ALT、AST、总胆红素(total bilirubin,TBil),计算肝指数,观察肝组织普通病理形态学变化,以确定致明显肝损伤的相对合适时间。并检测小鼠肝组织丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px),初步探讨黄药子致肝损伤的机理。
　　【结果】
　　(1)不同剂量黄药子煎剂灌胃对小鼠血清ALT、AST、肝指数的影响：与空白组比较,各剂量组黄药子煎剂对小鼠血清ALT、AST及肝指数均有明显影响(P<0.05)。高、中、低剂量三组之间两两比较,ALT的差异明显,黄药子剂量越大,ALT越高,与用药剂量呈正相关(P<0.05)；低与高、中剂量组间AST的差异有显著意义(P<0.05)；三组之间肝指数比较无显著统计学意义(P>0.05)。
　　(2)不同剂量黄药子煎剂灌胃对小鼠肝组织形态学的影响：低剂量组小鼠未出现明显肝损伤；中、高剂量组小鼠肝损伤明显,尤以高剂量组为甚。经肝细胞变性半定量分析,低剂量黄药子煎剂灌胃对小鼠肝细胞无明显影响(P>0.005),高、中剂量组与空白组相比有显著统计学意义(P<0.005)。
　　(3)高剂量黄药子煎剂灌胃不同时间对小鼠血清 ALT、AST、TBil 及肝指数的影响：6d、12d 组小鼠血清 ALT、AST、TBil 及肝指数明显升高,与空白组比较有显著的统计学意义(P<0.05)。但两组之间无显著统计学差异(P>0.05)。
　　(4)高剂量黄药子煎剂灌胃不同时间对肝组织形态学的影响：6d、12d组小鼠均出现明显肝组织损伤。经肝细胞变性半定量分析,高剂量黄药子煎剂灌胃6d、12d 与空白组比较均有显著统计学意义(P<0.005),但两组之间比较无显著统计学意义(P>0.005)。
　　(5)高剂量黄药子煎剂灌胃6d对小鼠肝组织MDA、GSH-Px的影响：与空白组比较,高剂量黄药子煎剂灌胃6d对小鼠肝组织MDA和GSH-Px水平影响不大,无显著统计学意义(P>0.05)。
　　【结论】(1)应用高剂量(240g·kg−1)黄药子煎剂灌胃 6d 可造成小鼠明显肝损伤。(2)自由基脂质过氧化可能没有参与黄药子煎剂诱导的肝损伤,但仍需在以后的实验中进一步确定。

目录

封面

声明

目录

中文摘要

英文摘要

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学分析

结果

1 黄药子煎剂对小鼠一般状况的影响

2 不同剂量黄药子煎剂灌胃6d对小鼠血清ALT、AST活性及肝指数的影响

3 不同剂量黄药子煎剂灌胃6d对小鼠肝组织形态学的影响

4 高剂量黄药子煎剂灌胃不同时间对小鼠血清ALT、AST、TBil及肝指数的影响

5 高剂量黄药子煎剂灌胃不同时间对小鼠肝组织形态学的影响

6 高剂量黄药子煎剂灌胃6d对小鼠肝组织MDA、GSH-Px的影响

讨论

1 现代医学对DILI的认识

2 中医学对DILI的认识

3 导师对DILI的认识

4 应用黄药子煎剂灌胃建立小鼠肝损伤模型的初步研究

结论

致谢

参考文献

附录

附录1 肝组织普通病理照片

附录2 文献综述