养卵增膜方对控制性超排卵小鼠子宫内膜容受性的影响

摘要

目的：观察养卵增膜方对控制性超排卵小鼠子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子(VEGF)、同源框基因10(HOXA10)表达的影响,探讨该方改善控制性超排卵小鼠子宫内膜容受性的效果及作用机理。
　　方法：选用SPF级昆明种未孕雌性小鼠50只做为研究对象,10~12周龄,体重30g±5g。将小鼠随机分为5组,为①空白组、②模型组、③阳性对照组、④中药低剂量组、⑤中药高剂量组,每组10只小鼠。模型组、阳性对照组、中药低剂量组和中药高剂量组小鼠用GnRHa+HMG+HCG方案进行控制性超排卵,每日给予丙氨瑞林(阿拉瑞林,GnRHa)40ug/100g腹腔注射,连续9天；第9天同时腹腔注射尿促性素(HMG) 40IU/100g,48h后腹腔注射绒促性素(HCG)100IU/100g；空白组同法腹腔注射生理盐水。阳性对照组、中药低剂量组和中药高剂量组给予药物灌胃,每日两次,连续11天；阳性对照组给予阿司匹林,中药低剂量组给予低剂量养卵增膜方(相当于成人的10倍等效剂量),中药高剂量组给予高剂量养卵增膜方(相当于成人的20倍等效剂量)；空白组和模型组同法给予生理盐水灌胃。腹腔注射HC G后,若小鼠阴道分泌物明显增多,且分泌物涂片在光学显微镜下见有大量的无核角化细胞,即为模型建立成功。腹腔注射HCG 48h后脱颈处死小鼠,剖腹取子宫,10%多聚甲醛固定后石蜡包埋,采用免疫组化SP法检测各组小鼠子宫内膜ER、PR、VEGF、HOXA10的表达情况。
　　结果：
　　①中药高剂量组ER表达高于其他各组,与模型组、中药低剂量组差异具有统计学意义(P<0.05),与阳性对照组、空白组差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化检测显示ER主要表达于小鼠子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的细胞核。
　　②中药高剂量组PR表达高于模型组、阳性对照组、中药低剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05)；略低于空白组,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化检测显示PR主要表达于子宫内膜腺上皮和间质细胞的细胞核。
　　③中药高剂量组VEGF表达高于其他各组,差异具有统计学意义(P<0.05)；中药低剂量组VEGF表达较阳性对照组较强,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化检测显示VE GF主要表达子宫内膜腺上皮细胞和间质。
　　④中药高剂量组HOXA10表达高于其他各组,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化检测显示HOXA10主要表达于子宫内膜腺上皮和间质,间质表达明显高于腺体。
　　结论：
　　①养卵增膜方可改善子宫内膜ER的表达,有助于E2生物活性的发挥,促进腺体增值,增进子宫内膜的发育。
　　②养卵增膜方可改善子宫内膜PR的表达,有助于P生物活性的发挥,促进子宫内膜的分泌和蜕膜化。
　　③养卵增膜方可通过提高子宫内膜VE GF的表达,增强着床期子宫内膜血管通透性和血管生成,改善内膜血供,以利于胚胎着床。
　　④养卵增膜方可上调着床期子宫内膜HOXA10的表达,诱导子宫内膜的蜕膜化而促进胚胎着床。
　　⑤养卵增膜方可通过多途径调节子宫内膜容受性,改善子宫内膜血流状况及局部微环境,为胚泡着床创造适宜条件。

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中文摘要

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前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 图像分析

4 统计学处理

结果

1 各组小鼠子宫内膜 ER的表达

2 各组小鼠子宫内膜PR的表达

3 各组小鼠子宫内膜VEGF的表达

4 各组小鼠子宫内膜HOXA10的表达

讨论

1 现代医学对子宫内膜容受性的认识

2 中医学对子宫内膜容受性的认识

3 导师对本病的认识

4 方药分析

5 养卵增膜方的疗效分析及作用机理

6 展望

结论

致谢

参考文献

附录