温通法对荷瘤鼠延长生存期及诱导细胞凋亡作用研究

摘要

目的：通过对荷S180肿瘤细胞昆明小鼠灌服温通代表中药附子、干姜、桂枝,观察小鼠在不同浓度温通中药作用下生存期的变化,并从诱导肿瘤细胞凋亡方面揭示温通法抑瘤机制,为温通法在恶性肿瘤领域的应用提供新的依据。
　　方法：建立S180小鼠模型,随机分为空白组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、环磷酰胺组,每组16只：8只观察生存期,其余8只取材。中药高、中、低剂量组小鼠于造模次日给予不同浓度的中药灌胃,0.4ml/只,每天1次；空白组于造模次日给予生理盐水灌胃,0.4ml/只,每天1次；环磷酰胺组造模72h后给予环磷酰胺30mg/kg腹腔注射,隔日1次；各组于造模第12天停止用药。每组处死8只小鼠,瘤体制作细胞悬液,采用Annexin-Ⅴ-FITC∕PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡率；分光光度法检测Caspase-3活性。另外每组8个小鼠,记录各小鼠生存时间并做生存分析。
　　结果：(1)生存期实验中,与空白组比较,中药高、中剂量组均有显著差异( P<0.05 )、中药低剂量组无显著差异( P>0.05 )、环磷酰胺组有极显著差异(P<0.01)；但中药高剂量组与环磷酰胺组比较无显著差异(P>0.05)。
　　(2)凋亡率检测实验中,与空白组比较,中药各剂量组及环磷酰胺组细胞凋亡率均有极显著差异(P<0.01)；中药三个剂量组间随着剂量的增大细胞凋亡率有所增高,各组间两两比较：中药高剂量组与中药低剂量组比较有显著差异(P<0.05),其余均无显著差异(P>0.05)；中药各剂量组细胞凋亡率均高于环磷酰胺组,与之相比有极显著差异(P<0.01)。
　　(3)Caspase-3 活性检测试验中,与空白组比较,中药各剂量组及环磷酰胺组瘤细胞 Caspase-3 活性均有极显著差异(P<0.01)；中药三个剂量组间随着剂量的增大瘤细胞Caspase-3活性逐渐提高,各组间两两比较：中药高、中剂量组间无显著差异(P>0.05),其余均有极显著差异(P<0.01)；与环磷酰胺组比较,中药各剂量组瘤细胞Caspase-3活性均有显著性差异(P<0.01)。
　　结论：(1)温通法可明显延长S180荷瘤鼠生存期；
　　(2)温通法可诱导S180荷瘤鼠癌细胞凋亡；
　　(3)温通法诱导S180荷瘤鼠癌细胞凋亡机制可能是通过线粒体途径实现的。

目录

封面

声明

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中文摘要

英文摘要

前言

材料和方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学处理

结果

1 温通法对荷瘤鼠生存期的影响

2 温通法对荷瘤鼠诱导细胞凋亡作用

理论探讨

1 祖国医学对温通法治疗恶性肿瘤的认识

2 现代中医医家对温通法治疗恶性肿瘤的认识和应用

3 现代医学关于细胞凋亡的研究

4 实验组方组方分析

5 实验结果分析

6 导师经验

结论

参考文献

致谢

附录 1：

附录 2：