羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响

摘要

目的:用抗肿瘤药羟喜树碱(HCPT)作用于人肾上腺皮质癌SW-13细胞，观察其对SW-13细胞增殖、凋亡的影响，并从分子水平研究羟喜树碱对SW-13细胞Wnt信号通路抑制因子DKK-1(Dickkopf-1)及Wnt信号通路关键调节因子的β-catenin的表达，探讨羟喜树碱抑制SW-13细胞增殖、促进凋亡的可能分子作用机制。
　　方法:体外培养人肾上腺皮质癌SW-13细胞，以浓度为0.25、0.5、1.0、2.0、4.0ug/mL的HCPT分别处理24、48、72h后，采用CCK8法测定细胞生长抑制率，计算出HCPT的IC50并选择最佳作用时间;并以IC50作为后续实验浓度，分为HCPT干预组与对照组，流式细胞仪检测细胞凋亡情况;利用荧光定量PCR检测细胞DKK-1和β-catenin的mRNA水平，免疫细胞化学检测DKK-1和β-catenin蛋白的表达。
　　结果：不同浓度HCPT分别作用24h、48h、72h后，SW-13细胞的生长增殖均明显受抑制（P＜0.05），并呈一定的时间及浓度依赖性;流式细胞术显示SW-13细胞在HCPT干预组较对照组凋亡率高(P＜0.05)，荧光定量PCR和免疫细胞化学均显示HCPT干预组较对照组DKK-1表达明显升高(P＜0.05)，而β-catenin的表达则无明显变化(P＜0.05)。
　　结论：HCPT可以明显抑制人肾上腺皮质癌SW-13细胞的生长增殖，促进其凋亡。HCPT可以上调人肾上腺皮质癌SW-13细胞DKK-1的表达，但DKK-1表达的增加，并未引起β-catenin mRNA水平及蛋白定位的改变。因此，诱导DKK-1表达的增加，可能是HCPT抑制细胞增殖、促进凋亡的作用机制之一，而DKK-1可能通过其它途径抑制细胞增殖，促进凋亡，并不一定通过介导Wnt/β-catenin信号通路起抗肿瘤作用。

目录

声明

部分英文缩略词语

摘要

前言

实验材料和方法

1．材料和设备

2 实验方法

结果

3．3 流式细胞术检测羟喜树碱对SW-13细胞凋亡的影响

3．4 HCPT对DKK-1和β-catenin基因转录的影响

3．5 HCPT对DKK-1、β-catenin蛋白表达的影响

讨论

1．HCPT的临床应用及可能的抗癌机制

2．HCPT对SW-13细胞增殖和凋亡的影响

3．HCPT抗SW-13细胞的可能分子机制

4、问题和展望

结论

参考文献

综述 β-catenin在内分泌肿瘤的研究进展

致谢