雾化吸入母牛分枝杆菌调控T细胞亚群和TGF-β/Smad通路预防小鼠哮喘及RSV感染

摘要

本文主要从以下几方面进行论述：
　　第一部分 母牛分枝杆菌雾化吸入调控T细胞亚群和TGF-β/Smad信号通路预防小鼠支气管哮喘
　　目的：研究雾化吸入母牛分枝杆菌对小鼠支气管哮喘的预防作用，探讨其可能作用机制。
　　方法：24只雌性BALB/C小鼠随机分为正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）和预防组（C组），每组8只。B、C组予鸡卵清蛋白制作哮喘模型;A组予PBS液替代鸡卵清蛋白。哮喘模型制造前30天C组雾化吸入母牛分枝杆菌（商品名:微卡），每天1次，连续5天;A、B组雾化吸入PBS液，每天1次，连续5天。各组小鼠在末次雾化后24h内予无创肺功能仪检测气道反应性，处死小鼠，收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(Bronchoalvelar lavage fluid,BALF)。BALF行细胞计数及分类计数; HE染色和PAS染色观察气道炎症;免疫组化检测TGF-β/Smad信号通路相关蛋白TGF-β1、TβR1、Smad1、Smad7的表达;流式细胞术检测γδTCR+ CD3+、IL-13+CD3+、TGF-β+CD3+T淋巴细胞百分数及IL-13+γδTCR+CD3+细胞、TGF-β+γδTCR+CD3+T淋巴细胞百分数。
　　结果：C组小鼠肺泡灌洗液中细胞总数、嗜酸性粒细胞比例、淋巴细胞比例明显低于B组(P＜0.01);肺组织TGF-β1、TβR1、Smad1蛋白表达量均低于B组（P＜0.01）;流式细胞术γδTCR+ CD3+T淋巴细胞、IL-13+CD3+T细胞占CD3+T细胞百分比均明显低于B组(P<0.01)。三组小鼠TGF-β+CD3+T细胞、IL-13+γδTCR+ CD3+T淋巴细胞组间比较有显著性差异(P＜0.05)。
　　结论：实验剂量微卡雾化吸入可预防小鼠支气管哮喘，其机制可能与调节T细胞亚群分布、下调TGF-β/Smad信号通路TGF-β1、TβR1、Smad1蛋白有关。
　　第二部分 母牛分枝杆菌雾化吸入调控T细胞亚群和TGF-β/Smad通路预防小鼠RSV感染
　　目的：研究雾化吸入母牛分枝杆菌对小鼠RSV感染的预防作用，探讨其可能作用机制。
　　方法：24只雌性BALB/C小鼠随机分为正常对照组（A组）、RSV感染组（B组）和预防组（C组），每组8只。B、C组予RSV滴鼻制作RSV感染模型，C组在造模前30天雾化吸入微卡，每天1次，连续5天。在RSV感染后第4天处死小鼠，电镜检测肺RSV感染情况;HE染色观察气道炎症;免疫组化检测TGF-β1、TβR1蛋白表达;流式细胞分析术检测γδTCR+CD3+、 IL-13+CD3+、 TGF-β+CD3+T淋巴细胞百分数及IL-13+γδTCR+CD3+、TGF-β+γδTCR+CD3+T淋巴细胞百分数。
　　结果：较B组相比，C组电镜下RSV感染明显减少;HE染色炎症明显减轻;免疫组化显示肺组织TGF-β1、TβR1蛋白表达量下降;肺γδTCR+CD3+、IL-13+CD3+、TGF-β+CD3+、IL-13+γδTCR+CD3+、TGF-β+γδTCR+ CD3+T淋巴细胞百分数明显下降。
　　结论：雾化吸入实验剂量母牛分枝杆菌可以预防小鼠RSV感染，其机制可能与其调控T细胞亚群和TGF-β/Smad信号通路、抑制IL-13和TGF-β1分泌有关。

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摘要

前言

参考文献

第一部分母牛分枝杆菌雾化吸入调控T细胞亚群和TGF-β／Smad信号通路预防小鼠支气管哮喘

引言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分母牛分枝杆菌雾化吸入调控T细胞亚群和TGF-β／Smad通路预防小鼠RSV感染

引言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述

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