红霉素对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠骨骼肌炎症的影响及其相关机制

摘要

目的：观察肺气肿小鼠骨骼肌组织中炎症因子、炎症调控基因组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)及核因子-κB(NF-κB)的变化，并观察红霉素对骨骼肌炎症的影响。
　　方法：采用单纯烟草烟雾暴露的方法建立肺气肿小鼠(BALB/c)模型，模型建成后，将小鼠随机分为烟雾暴露组（TS组）和红霉素组（EM组），每组6只。另设正常对照组（C组）。EM组小鼠每日烟雾暴露前1h予红霉素灌胃，80mg/kg/只，TS组则给予等剂量的生理盐水。4周后处死各组小鼠。苏木素-伊红(HE)染色观察肺部病理改变，计算平均内衬间隔(MLI);观察小鼠股四头肌病理结构变化，计算肌纤维平均横截面积(CSA)。酶联免疫吸附法（ELISA法）检测骨骼肌匀浆中白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;蛋白免疫印迹(WB)方法检测HDAC2、NF-κB p65及肌球蛋白重链(MyHC)蛋白在骨骼肌组织中的表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定骨骼肌组织中HDAC2、NF-κBmRNA的相对表达水平。
　　结果：1、肺气肿模型评估：TS组小鼠肺泡壁破坏、肺泡腔扩大，气道及肺部可见以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润，平均内衬间隔(MLI)明显大于C组(P＜0.05)。肺功能指标中特殊气道阻力(sRaw)高于C组(P＜0.001)，潮气量(TV)、呼气峰流速(PEF)及EF50均低于C组（均P＜0.05）。2、小鼠体重变化：烟雾暴露过程中TS组小鼠体重呈无增长状态(P＞0.05）;而EM组小鼠虽然体重增长缓慢，但仍有所增加（28周时平均体重比0周时增加，P＜0.05);该两组小鼠体重均低于C组(均P＜0.05)。3、骨骼肌组织的病理形态学变化：TS组和EM组小鼠股四头肌中肌纤维排列紊乱，部分肌纤维溶解、断裂、坏死。TS组和EM组肌纤维的CSA无明显差别(P=0.737)，而均小于C组（均P＜0.001）。4、小鼠骨骼肌中炎症因子IL-8、TNF-α的含量：TS组小鼠IL-8、TNF-α的含量均明显高于C组(均P＜0.001);EM组与TS组相比，IL-8、TNF-α的含量均明显下降(P＜0.01，P＜0.001)。5、小鼠骨骼肌组织中MyHC蛋白的表达：TS组小鼠MyHC蛋白的表达水平与C组相比下降明显(P＜0.001)。红霉素干预后，小鼠的MyHC蛋白水平仍明显低于C组(P＜0.001)，但较TS组表达增加(P＜0.05)。6、小鼠骨骼肌组织中NF-κB的表达：与C组相比，TS组NF-κB mRNA及p65蛋白的表达水平显著增高(P＜0.001，P＜0.01)。与TS组相比，EM组小鼠的NF-κBmRNA及p65蛋白水平明显降低(P＜0.01，P＜0.01)。7、小鼠骨骼肌组织中HDAC2的表达：TS组小鼠HDAC2mRNA及蛋白的相对表达量明显低于C组(P＜0.001，P＜0.01)。EM组的HDAC2mRNA及蛋白水平仍低于C组(P＜0.001，P＜0.05)，但明显高于TS组(P＜0.001，P＜0.001)。
　　结论：1、烟草烟雾暴露肺气肿小鼠的骨骼肌发生了结构改变及炎症反应，骨骼肌中转录因子NF-κB表达增强，炎症调控基因HDAC2表达减弱。2、红霉素减轻烟草烟雾暴露肺气肿小鼠骨骼肌组织的炎症反应，可能是通过提高HDAC2的表达，抑制NF-κB的表达而实现。

目录

声明

个人简历

主要英文缩略词表

摘要

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

1 肺气肿小鼠模型评估

2 各组小鼠体重变化

3 光镜下骨骼肌组织的病理学变化

4 小鼠骨骼肌组织匀浆中炎症因子IL-8、TNF-α的含量

5 小树骨骼组织中肌球蛋白重链(MyHC)蛋白的表达水平

6 小鼠骨骼肌组织中NF-κB的表达水平

7 小鼠骨骼肌组织中HDAC2的表达水平

讨论

1 烟草烟雾对肺气肿小鼠后肢骨骼肌的影响

2 红霉素对肺气肿小鼠骨骼肌炎症的影响

3 总结与展望

结论

参考文献

综述 PI3K／Akt信号通路及其相关药物在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间公开发表的论著