MLPA在脊髓性肌萎缩症产前诊断中的应用研究

摘要

目的：脊髓性肌萎缩症（SMA）为第二常见的致死性常染色体隐性遗传性神经变性疾病，至今仍然没有有效的治疗方法。及早对SMA家系中的成员进行基因诊断,对高风险胎儿进行产前诊断，是控制其发生和发展以及降低出生缺陷率的关键。本实验研究应用多重连接依赖性探针扩增技术（MLPA），通过对SMA家系进行相关基因的筛查，完成SMA家系的基因诊断和产前诊断，并探讨MLPA在脊髓性肌萎缩症产前诊断中的应用价值，减少出生缺陷，提高出生人口素质。
　　方法：收集我院产前诊断中心就诊的3个SMA家系（共10例）,采集患儿及其父母的外周血及妊娠16-24+6周的羊水，采用TIANGEN血液及细胞基因组DNA提取试剂盒提取外周血基因组DNA及羊水细胞DNA，运用MLPA技术检测SMA致病基因运动神经元存活基因(SMN)的表达情况。
　　结果：3个SMA家系中,家系I先证者属于SMN1外显子7和8纯合缺失，SMN2外显子7和8杂合重复；3个家系父母均有SMN1外显子7和8杂合缺失，家系I母亲和家系III父亲合并SMN2外显子7和8杂合重复，家系II父亲合并SMN2外显子7和8杂合缺失。3例胎儿均属于SMN1外显子7和8杂合缺失，SMN2外显子7和8为正常拷贝，经遗传咨询，其父母商量后均决定继续妊娠。
　　结论：MLPA是一种检测遗传性疾病基因缺失和重复突变的高通量有效新技术，能对DNA序列进行定性和半定量分析，这一特点使得该技术在SMA疾病诊断中更为快捷、简便、可靠。运用MLPA技术对SMN基因的拷贝数进行定量分析，明确SMN基因的表达情况，为SMA家系的基因诊断和产前诊断提高确诊率，为SMA疾病的遗传咨询提供可靠信息。

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中文摘要

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前言

研究对象与实验方法

1、研究对象

2、主要试剂、仪器和软件

3、实验方法

结果

1、羊水染色体核型分析

2、MLPA峰型图谱分析

2、拷贝数分析

讨论

1、SMA发病机制

2、SMN基因型、拷贝数与临床表型的关系

3、SMA的分子诊断技术

4、基因诊断和产前诊断的临床应用

结论

不足与展望

不足

展望

参考文献

附录

综述:脊髓性肌萎缩症产前诊断技术新进展

致谢

研究生期间发表的论文