黄芩苷联合美罗培南对小鼠腹腔铜绿假单胞菌早期生物被膜作用的体内研究

摘要

目的:通过构建小鼠腹腔内铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，P.a)早期生物被膜(Biofilm，BF)的感染模型，研究黄芩苷(Baicalin，BA)联合美罗培南(Meropenem，MEM)对铜绿假单胞菌体内早期生物被膜感染的影响。
　　方法:采用输液管为实验载体，PAO1野生株作为实验菌株，将32只雌性小鼠随机分组，每组8只，即空白对照组、黄芩苷组（60mg/Kg.d）、美罗培南组(50mg/Kg.d)、黄芩苷(60mg/Kg.d)+美罗培南（50mg/Kg.d）组。成功构建小鼠腹腔早期生物被膜感染模型后开始给予腹腔注射上述药物，空白对照组注射等量无菌生理盐水。药物作用24h后于小鼠心脏取血计数白细胞，行连续稀释法载体表面活菌计数，扫描电子显微镜(Scanning electron microscope，SEM)观察载体表面生物被膜形态，取腹腔局部炎症组织HE染色观察病理组织学变化。
　　结果:37℃培养20h铜绿假单胞菌形成早期生物被膜，将载体放置于小鼠腹腔内可成功构建体内感染模型。药物作用24h后，黄芩苷组、美罗培南组、黄芩苷+美罗培南组外周血白细胞计数均少于空白对照组(P＜0.05);美罗培南组较黄芩苷组减少(P＜0.05);黄芩苷+美罗培南组较黄芩苷组、美罗培南组均减少(P＜0.05)。药物单独作用组或联合组载体表面菌落计数均少于空白对照组(P＜0.01);美罗培南组较黄芩苷组减少(P＜0.01);黄芩苷+美罗培南组均较黄芩苷组、美罗培南组明显减少(P＜0.01)。空白对照组SEM观察载体表面细菌均比黄芩苷组、美罗培南组、黄芩苷+美罗培南组形成的生物被膜多而稠厚;美罗培南组较黄芩苷组稀薄;黄芩苷+美罗培南组生物被膜基本被破坏清除，仅见少量铜绿假单胞菌粘附。空白对照组的炎症组织中有大量的淋巴细胞和巨噬细胞浸润，可见渗出和出血;相比空白对照组，黄芩苷组、美罗培南组的组织损伤均减轻，但仍可见局部炎症细胞浸润;美罗培南组较黄芩苷组渗出减少;黄芩苷+美罗培南组组织结构比较清晰，仅见少量散在的炎症细胞。
　　结论:1、黄芩苷可破坏铜绿假单胞菌体内早期生物被膜;2、美罗培南对铜绿假单胞菌体内早期生物被膜具有一定的杀菌作用;3、黄芩苷联合美罗培南对铜绿假单胞菌体内早期生物被膜具有协同杀菌效果。

目录

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个人简历

主要缩略语

摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

3 统计学方法

1 Baicalin对P．a BF的破坏作用及联合MEM的杀菌作用

2 外周血白细胞计数

3 腹腔载体SWM观察结果

4 腹腔炎症组织病理学观察

讨论

结论

参考文献

综述 铜绿假单胞菌生物被膜形成及其相关感染治疗研究进展

致谢

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