灵香草中三萜皂苷及其抗肿瘤活性研究

摘要

灵香草（Lysimachia foenum-graecum hance）为报春花科（Primulaceae）珍珠菜属植物，最近的分子生物学证据表明其属于紫金牛科(Myrsinaceae)。主要分布于广西、四川、云南、贵州、湖北、广东等地，用作香料、驱虫剂以及治疗伤风、头痛、齿痛、咽喉肿痛等。研究表明，灵香草中主要含有三萜皂苷、黄酮、挥发油等化学成分，具有细胞毒、抗氧化、抗菌等生物活性。
　　本课题运用多种现代分离技术和波谱技术对灵香草正丁醇提取物进行了系统的化学成分研究，从中共分离鉴定了21个齐墩果烷型三萜皂苷类化合物，可分为三种类型:13β，28-环氧-齐墩果烷型(1-6，15-21)，△12-齐墩果烯型(7-11)，28，30-内酯-齐墩果烷型(12-14)。这21个三萜皂苷分别鉴定为:foegraecumosides A-E(1-5)，foegraecumosides L(6)，foegraecumosides F-H(7-9),foegraecumosides M-N(10-11),foegraecumosides I-K(12-14),lysichriside A(15),ardisiacrispin B(16),ardisiacrispin A(17),ardisimamilloside A(18),3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl cyclamiretin A(19),ardisimamilloside B(20)，ardisimamilloside H(21)。化合物1-14为新化合物。
　　对化合物1-21进行抗肿瘤活性测试，结果表明:苷元为cyclamiretin A的所有13β，28-环氧-齐墩果烷型三萜皂苷（1，2，15-17以及19）对测试肿瘤细胞均具有较强活性(IC50-9.28～24.52μM)，而其余三萜皂苷(3-14，18，20，21)对测试细胞没有明显活性(IC50＞50μM)。通过比较化合物1和2，以及20和21的细胞毒活性测试结果，可得出结论:16位羟基对于13β，28-环氧-齐墩果烷型三萜皂苷的抗肿瘤活性有影响。同时，本课题还对具有抗肿瘤活性的三萜皂苷进行了细胞耐药性测试，结果表明化合物16对肺癌耐药细胞株A549/CDDP表现出较强活性（IC50=8.74μM），且耐药因子(RF)为0.91。
　　本课题的研究结果丰富了珍珠菜属植物中三萜皂苷的种类，同时其生物活性测试表明灵香草可以作为发现抗癌药物的潜在物种，这对于更好地开发利用灵香草资源奠定了一定的理论基础。

目录

摘要

前言

第一章 珍珠菜属植物三萜皂苷类化合物及其药理活性研究进展

1．1 珍珠菜属植物中三萜皂苷类化合物研究概况

1．2 珍珠菜属植物药理作用

1．2．1 细胞毒活性

1．2．2 杀菌抗炎活性

1．2．3 其他生物活性

第二章 灵香草化学成分及药理活性研究进展

2．1 灵香草化学成分研究概况

2．1．1 三萜皂苷类

2．1．2 黄酮类

2．1．3 挥发油类

2．1．4 其他类型化合物

2．2 灵香草药理作用研究概况

2．2．1 细胞毒活性

2．2．2 抗氧化活性

2．2．3 抑菌活性

2．2．4 抗肥胖活性

2．2．5 其他生物活性

第三章 灵香草化学成分研究

3．1 新化合物的结构鉴定

3．1．1 Foegraecumoside A(1)的结构鉴定

3．1．2 Foegraecumoside B(2)的结构鉴定

3．1．3 Foegraecumoside C(3)的结构鉴定

3．1．4 Foegraecumoside D(4)的结构鉴定

3．1．5 Foegraecumoside E(5)的结构鉴定

3．1．6 Foegraecumoside L(6)的结构鉴定

3．1．7 Foegraecumoside F(7)的结构鉴定

3．1．8 Foegraecumoside G(8)的结构鉴定

3．1．9 Foegraecumoside H(9)的结构鉴定

3．1．10 Foegraecumoside M(10)的结构鉴定

3．1．11 Foegraecumoside N(11)的结构鉴定

3．1．12 Foegraecumoside I(12)的结构鉴定

3．1．13 Foegraecumoside J(13)的结构鉴定

3．1．14 Foegraecumoside K(14)的结构鉴定

3．2 已知化合物的结构鉴定

3．2．1 Lysichriside A(15)的结构鉴定

3．2．2 Ardisiacrispin B(16)的结构鉴定

3．2．3 Ardisiacrispin A(17)的结构鉴定

3．2．4 Ardisimamilloside A(18)的结构鉴定

3．2．5 3-Ο-β-D-glucopyranosyl-(1→2)α-L-arabinopyranosyl cyclamiretin A(19)的结构鉴定

3．2．6 Ardisimamilloside B(20)的结构鉴定

3．2．7 Ardisimamilloside H(21)的结构鉴定

第四章 灵香草中三萜皂苷的抗肿瘤活性研究

4．1 化合物1—21抗肿瘤活性测试

4．1．1 细胞株

4．1．2 实验方法(MTT法)

4．1．3 灵香草粗提物细胞毒活性测定结果

4．1．4 化合物1-21细胞毒活性测定结果

4．1．5 化合物1，2，15-17，19对药敏性细胞和耐药性细胞(分别为A549和A549/CDDP)细胞毒活性测定结果

5．1 实验仪器和试剂

5．1．1 仪器

5．1．2 色谱材料

5．1．3 试剂

5．2 植物材料

5．3 灵香草的提取与分离

5．4 新化合物的水解

5．4．1 新化合物水解反应

5．4．2 新化合物水解所得糖HPLC分析

5．5 灵香草中三萜皂苷的理化及波谱数据

第六章 总结与讨论

6．1 灵香草中三萜皂苷的研究结果

6．2 灵香草中三萜皂苷生物活性研究

参考文献

附录

读硕期间发表的论文

致谢

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