Aspergillus oryzae的紫外诱变及蛋白酶活性的比较

摘要

该文的主要工作是利用经典的紫外线诱变法对酱油酿造的主要菌种米曲霉(Aspergillus oryzae)进行诱变,以提高蛋白酶活力.考虑到采用较强的诱变剂量处理抗逆性很强的孢子,常导致突变株在蛋白酶活力上升的同时出现生长迟缓的现象,该文在传统的对孢子诱变的基础上,采用了对发芽后的孢子进行诱变的方法.发芽孢子单体存在时更利于突变的发生.在Czapek Dox培养液中添加适量(0.15%)与霉菌细胞壁物质几丁质结构相似的脱乙酰几丁质(chitosan)可明显减少菌丝体的生成,提高发芽孢子单体存在的比率,而添加0.1%蛋白胨(polypeptone)能有效地提高孢子的发芽率.利用孢子的疏水性,用大豆油来外理培养液能有效地去除未发芽孢子,以提高发芽孢子单体存在率.

目录

摘要

Abstract

导论

1材料和方法

1.1出发菌株及其形态特性

1.2培养基

1.3培养方法及菌种保藏

1.4生存曲线的测定

1.4.1孢子生存曲线的测定

1.4.2发芽孢子生存曲线的测定

1.5诱变及变异株的取得

1.5.1诱变

1.5.2初筛方法

1.5.3复筛方法

1.6发酵试验

1.7测定方法

1.7.1蛋白酶的测定方法

1.7.2蛋白质含量的测定

1.8聚丙烯酰胺凝胶电泳

2结果分析

2.1变异株的取得

2.1.1初筛的结果

2.1.2复筛的结果

2.2发酵试验

2.2.1游离氨基酸的测定

2.2.2黄曲霉毒素的检测

2.2.3蛋白质利用率的测定

2.3突变株的培养及形态特征

2.4聚丙烯酰胺凝胶电泳

3讨论

4总结

参考文献

致谢

已发表的论文

附