香蕉（Musa spp.）遗传多样性及亲缘关系的RAPD分析

摘要

香蕉(Musa spp.)是一种主要的热带、亚热带农业作物.虽然在国际商贸中占有重要地位,但人们对其遗传系统知之甚少.与其它农作物(水稻、玉米等)相比,香蕉的分子水平研究相对较少.本研究对24个不同国家、地区来源的香蕉进行的RAPD分析.结果如下:1.暗处理两天,改良SDS和CTAB均可从半展的香蕉幼叶中提取高质量的DNA.2.对RAPD条件优化分析,确定了香蕉RAPD分析的最佳方案,即PCR扩增程序为94℃预变性4mi n,94℃变性60S,37℃复性60S,72℃延伸1 05S,共40个循环,最后72℃延伸1 0mi n;25μ l反应体系中包括:200 μ mol/L dNTP,2.0 mmo l/L Mg<'2+>,0.3 μ mol/L引物,模板DNA20~50ng,Ex-Taq酶1 U,2.5μl 10×缓冲液.3.利用18个引物对供试品种扩增的DNA谱带,进行了UPGMA聚类分析,在此基础上构建了24个香蕉种质的分子树状图.依据此图,供试香蕉种质分成三大类群:第一类群有20个种质,第二类群包括3个香蕉种质,第三类群只含广西鸡蕉(龙牙蕉类)一个种质.其中第一类群又可分为五个亚群:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ.4.用双引物RAPD评价三个巴西种质的亲缘关系,用双引物RAPD获得巴西变种与巴西香蕉间的相似系数为0.5714,低的相似系数说明巴西变种不大可能由巴西香蕉衍生而来.单、双引物扩增结果的比较表明:双引物RAPD扩增可产生更多的多态性片段.

目录

文摘

英文文摘

1前言

1.1香蕉的植物学特征

1.2香蕉的营养和用途

1.3香蕉的地理分布

1.4香蕉的经济价值

1.5香蕉的遗传标记

1.5.1香蕉的遗传标记的必要性

1.5.2香蕉遗传标记的发展

2.材料与方法

2.1试验植物材料

2.2试验仪器设备

2.3试验生化药剂

2.4 RAPD分析方法

2.4.1植物总DNA提取

2.4.2 DNA浓度及纯度检测

2.4.3 PCR扩增

3.结果与分析

3.1香蕉总DNA的提取

3.1.1不同提取方法对DNA质量和产量的影响

3.1.2不同取材部位和处理DNA的质量和产量

3.2香蕉RAPD分析

3.2.1 RAPD反应条件的优化

3.2.2引物筛选

3.2.3双引物扩增以及巴西变种和巴西香蕉的亲缘分析

3.2.4多样性分析

3.2.5差异带的应用

图及表

4讨论

4.1香蕉总DNA的提取

4.2香蕉RAPD反应的优化与重复性

4.3 RAPD技术在香蕉种质资源遗传多样性研究中的可行性

4.4香蕉的双引物扩增

参考文献

致谢